[发明专利]一种提取纯化榆绿木脂素A的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取技术领域，涉及一种提取纯化榆绿木脂素A的方法。

背景技术

榆绿木脂素A（Anolignan A），分子式为C₁₉H₁₈O₄，分子量为310.35，为类白色无定形粉末，是从使君子科(Combretaceae)披针形榆绿木变种Anogeissus acuminata(Roxb.ex DC.)Guill.&Pers.var.lanceolata Wall.ex C.B.Clarke的茎分离出的一种木脂素类化合物。药理研究表明，榆绿木脂素A具有抑制HIV-1逆转录酶活性，IC₅₀为60.4μg/ml。

目前尚未检索到榆绿木脂素A的制备方法报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取纯化榆绿木脂素A的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于包括以下步骤：以披针形榆绿木变种的茎为原料，粉碎，用60-95%乙醇浸泡2-8h，然后超声提取，将提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备型液相色谱分离，即可获得榆绿木脂素A。

所述硅藻土与活性炭的混合物中硅藻土与活性炭的质量比为1:1。

所述氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-7bar，柱径高比为1:6-10。

所述石油醚-丙酮体积比为17-2:1。

所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为68-75%，流速为15-100ml/min。

本发明采用超声提取、柱层析及制备液相色谱分离纯化，具有生产过程简单，易于实现工业化等优点。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取2kg，粉碎，用4倍量95%乙醇浸泡8h，然后超声提取1.5h，超声功率为55KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3%（w/v），充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱（柱压为6bar，柱径高比为1:6），用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以72%甲醇水溶液为流动相，控制流速为15ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为96.6%。

实施例2：

以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取2kg，粉碎，用60%乙醇浸泡2h，然后超声提取2h，超声功率为50KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3%（w/v），充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱（柱压为5bar，柱径高比为1:10），用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以75%甲醇水溶液为流动相，控制流速为100ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为97.6%。

实施例3：