[发明专利]一种枣任碱的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种枣任碱的纯化方法，特别是涉及一种应用超临界CO₂萃取和高速逆流色谱提取纯化枣任碱的方法。

背景技术

枣任碱为异喹啉生物碱，mp.264～268℃(分解)(甲醇-二氯甲烷)，无光学活性。分子式：C₁₇H₁₅NO₃，分子量：281.31，分子结构式：

。

枣任碱具有神经肌肉阻断作用。对青蛙由直接或间接刺激产生的肌肉收缩有阻断作用，其有效剂量为271μM(86μg/mL）。

柳叶木兰（学名：Magnolia salicifolia）属于木兰科木兰属，是日本的特有植物，人工栽培较少见。其叶含生物碱、酚类和挥发油(主要成分为芳樟醇、甲基丁香油酚、苯乙醇等)；根和茎皮含黄心树宁碱、氧化黄心素宁碱、柳叶木兰碱和枣任碱等；其花性温，味苦辛，有止咳、化浊之功效，且香味浓烈，是熏制茶叶和提炼香料的重要原料。

经检索，尚未见采用超临界流体萃取结合高速逆流色谱法纯化枣任碱的方法报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种环保型的枣任碱的纯化方法，该方法产品收率高、含量高。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：以柳叶木兰为原料，粉碎，加入碱性醇浸润1-4小时，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，收集枣任碱萃取物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，氨化沉淀，以正己烷-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离沉淀物，分离液减压干燥即得高含量枣任碱。

所述的碱性醇为60-90%乙醇，氨水调节pH9-12。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为38-55℃，萃取压力为28-45MPa，CO2流量为20-60L/h，萃取时间为1-3h，分离釜Ⅰ温度为22-45℃，压力为8-15MPa，分离釜Ⅱ温度为18-25℃，压力为4-6MPa。

所述的正己烷-甲醇-水比例为（5-8）：（6-7）：5。

本发明的积极效果在于：

1)方法采用超临界CO₂萃取，是一种环保无污染的方法，提取时间短，效率高，能耗较低，CO₂重复利用。

2)方法采用高速逆流色谱分离，是一种液液萃取方法，没有产品损失，是一种高效分离方法，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取柳叶木兰1kg，粉碎，加入90%乙醇（氨水调节pH9）调节浸润4小时，加入萃取釜中，开启设备调节参数：萃取温度为55℃，萃取压力为28MPa，分离釜Ⅰ温度为45℃，压力为8MPa，分离釜Ⅱ温度为18℃，压力为4MPa。达到上述参数后，以20L/h流量萃取萃取1h，收集解析物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，加氨水氨化放置沉淀，过滤得沉淀物，取正己烷、甲醇、水，按比例为8：7：5混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/s，取乙酸乙酯溶解沉淀物注入色谱仪，分离枣任碱，收集枣任碱流分，减压干燥得白色枣任碱8.2mg，含量98.1%。

实施例2：

取柳叶木兰1kg，粉碎，加入60%乙醇（氨水调节pH12）调节浸润1小时，加入萃取釜中，开启设备调节参数：萃取温度为38℃，萃取压力为45MPa，分离釜Ⅰ温度为22℃，压力为15MPa，分离釜Ⅱ温度为25℃，压力为6MPa。达到上述参数后，以40L/h流量萃取萃取3h，收集解析物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，加氨水氨化放置沉淀，过滤得沉淀物，取正己烷、甲醇、水，按比例为5：6：5混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节950r/s，取乙酸乙酯溶解沉淀物注入色谱仪，分离枣任碱，收集枣任碱流分，减压干燥得白色枣任碱7.8mg，含量97.7%。

实施例3：

取柳叶木兰10kg，粉碎，加入80%乙醇（氨水调节pH11）调节浸润2小时，加入萃取釜中，开启设备调节参数：萃取温度为50℃，萃取压力为33MPa，分离釜Ⅰ温度为25℃，压力为10MPa，分离釜Ⅱ温度为20℃，压力为5MPa。达到上述参数后，以60L/h流量萃取萃取3h，收集解析物，用3%盐酸水溶液溶解，过滤，加氨水氨化放置沉淀，过滤得沉淀物，取正己烷、甲醇、水，按比例为7：7：5混合，以下相为固定相，上相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节1000r/s，取乙酸乙酯溶解沉淀物注入色谱仪，分离枣任碱，收集枣任碱流分，减压干燥得白色枣任碱69.3mg，含量98.3%。