[发明专利]一种黄果茄甾醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种黄果茄甾醇的制备方法，尤其是一种应用膜分离和高速逆流色谱技术从黄果茄中制备黄果茄甾醇的方法。

背景技术

黄果茄（Solanum xanthocarpum Schrad,et Wendl）异名大苦果、野茄果，常见于云南省河口、蒙自、元江、元谋、禄劝、巧家海拔125—880米地区，个别也上达到海拔1100米，喜生于干热河谷沙滩上。我国湖北、四川、广东及台湾也有。广泛分布于热带亚洲（阿拉伯地区，印度，斯里兰卡，马六甲，越南，泰国）、澳洲及波里尼西亚和日本南部。黄果茄味苦辛，温，具有清热利湿，消瘀止痛的功效。印度民间常用本植物治疗咳嗽、发热及心脏病。其全草的醇提取部分有强心作用。对离体蛙心、猫心房戌心室肌、乳头肌在一定浓度时，能增强其收缩及张力，但如浓度过高，反降低其收缩力。长期用药可显著降低豚鼠肺及支气管中组织胺含量（80％），而对皮肤、胃的组织胺有轻度上升。

黄果茄中含有生物碱、脂肪油和在甾醇类物质，甾醇之一为黄果茄甾醇。已经黄果茄甾醇具有保肝作用，在浓度10毫克/千克，对CCl₄诱导的小鼠肝损伤有保护作用，此外黄果茄甾醇还可作为抗炎剂使用。

黄果茄甾醇：黄色片状物（丙酮），mp251℃。分子式：C₃₇H₅₄O₄，分子量：562.84，

现有技术中，黄果茄甾醇提取分离方法较少，均为实验室成分鉴别应用方法，如正丁醇萃取、硅胶柱层析等，这些方法制备的黄果茄甾醇纯度低，制备量小。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，成本低，纯度高的黄果茄甾醇的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

1）醇提：取黄果茄的果实破碎，加入5-10倍量（V/W）的70-80%的乙醇溶液加热回流提取2-3次，每次1-3h，过滤，合并提取液；

2）活性炭脱色：上述提取液加入提取液量5%药用活性炭，50℃保温脱色60min，得到脱色液；

3）膜分离：上述脱色液通过超滤膜系统，收集透过液；

4）高速逆流色谱分离：将透过液浓缩，干燥得到黄果茄甾醇粗品，采用高速逆流色谱进行分离，制得黄果茄甾醇。

步骤3）中所述超滤膜系统为中空纤维超滤膜系统，截留分子量为1000-3000。

步骤4）中所述高速逆流色谱中两相溶剂系统为正己烷（4-7）：乙酸乙酯（2-5）：甲醇（4-6）：水（5）。

综上所述，本发明存在以下优点：本工艺采用提取法制备黄果茄甾醇，超滤除具有明显的滤除胶体杂质的性能外，还具有良好的脱色效果；采用高速逆流色谱分离制备量大，周期短，产品纯度高，而且分离过程样品无损失，无污染。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取黄果茄的果实1kg，破碎，加入5倍量（V/W）的80%的乙醇溶液加热回流提取3次，每次1h，过滤，合并提取液，加入5%药用活性炭，50℃保温脱色60min，得到脱色液，再将脱色液通过截留分子量为3000的中空纤维超滤膜系统超滤，收集透过液，浓缩，干燥得到黄果茄甾醇粗品。将正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按4：5：6：5体积比量取，置于分液漏斗中混合均匀，静止分层，分离上下相，以上相为固定相，以下相为流动相，取上述粗品适量溶于下相中待用，开启高速逆流色谱仪，以3ml/min流速泵入流动相，当流动相流出，开始连续进样，收集黄果茄甾醇流分，浓缩，低温干燥即得黄果茄甾醇5.5mg，经HPLC检测，纯度为97.6%。

实施例2

取黄果茄的果实10kg，破碎，加入8倍量（V/W）的70%的乙醇溶液加热回流提取2次，每次3h，过滤，合并提取液，加入5%药用活性炭，50℃保温脱色60min，得到脱色液，再将脱色液通过截留分子量为1000的中空纤维超滤膜系统超滤，收集透过液，浓缩，干燥得到黄果茄甾醇粗品。将正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按7：2：4：5体积比量取，置于分液漏斗中混合均匀，静止分层，分离上下相，以上相为固定相，以下相为流动相，取上述粗品适量溶于下相中待用，开启高速逆流色谱仪，以2.5ml/min流速泵入流动相，当流动相流出，开始连续进样，收集黄果茄甾醇流分，浓缩，低温干燥即得黄果茄甾醇62.1mg，经HPLC检测，纯度为95.8%。

实施例3

取黄果茄的果实10kg，破碎，加入8倍量（V/W）的75%的乙醇溶液加热回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，加入5%药用活性炭，50℃保温脱色60min，得到脱色液，再将脱色液通过截留分子量为2000的中空纤维超滤膜系统超滤，收集透过液，浓缩，干燥得到黄果茄甾醇粗品。将正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水按5：4：5：5体积比量取，置于分液漏斗中混合均匀，静止分层，分离上下相，以上相为固定相，以下相为流动相，取上述粗品适量溶于下相中待用，开启高速逆流色谱仪，以2.8ml/min流速泵入流动相，当流动相流出，开始连续进样，收集黄果茄甾醇流分，浓缩，低温干燥即得黄果茄甾醇52.3mg，经HPLC检测，纯度为98.4%。