[发明专利]一种生物有机肥发酵菌种S4的制备方法

权利要求书

1.一种生物有机肥发酵菌种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens )S₄，其保藏编号为：CCTCC No.M 2010249。

2.一种生物有机肥发酵菌种的制备方法，其特征在于制备步骤为：

1）、种子培养，以权利要求1、权利要求2所述的菌种短杆菌S₄在种子三角瓶中进行种子培养，在种子三角瓶内加入培养基MD，种子培养条件：培养基灭菌后接入斜面母种，在28～30℃下，振荡培养16～22小时，所述培养基其组成质量百分数比：葡萄糖0.7～1.0%，蛋白胨0.6～0.8%，酵母膏0.3～0.5%，Na Cl  0.2～0.4%，KH₂PO₄  0～0.2%其余为水，将PH调至6.7～8.0；

2）、扩繁培养，在发酵罐中加入培养基MD，灭菌后按照发酵罐培养基MD的3～8%体积比接入上述培养物混合后作种子，扩繁培养条件：罐压为0.4～0.6Mpa，罐温为28～30℃，空气流量为0.3～0.6(v/v/min)，搅拌器转速为200rpm，扩繁培养18～24小时, 当培养液的OD值为OD600nm下降0.02时终止发酵；

3)、产品培养，在大型发酵罐中加入培养基MD，灭菌后按照发酵罐培养基的3～8%体积比接入扩繁培养的培养物作液体种子，产品培养条件：罐压为0.4～0.6Mpa，罐温为28～30℃，空气流量为0.3～0.6(v/v/min)，搅拌器转速为140～200rpm，产品培养18～24小时；当培养液的OD值为OD600mn下降0.02时终止发酵；

4）、将上述发酵培养物经膜滤浓缩1～8倍，检测得液态菌剂；或将上述发酵培养物经膜滤浓缩1～8倍后，加入分散剂，进一步干燥得固态菌剂产品。

3.根据权利要求1或2的一种生物有机肥发酵菌种的使用方法，其特征是能够单独使用，或者与短杆菌D₁菌联合使用，联合使用时的比例为：短杆菌D₁菌：解淀粉芽孢杆菌S₄菌=1～4:1。