[发明专利]一种发酵生产沙利霉素工艺

说明书

技术领域

本发明涉及沙利霉素的发酵工艺优化方法，特别是涉及一种菌体生长期补糖菌体产素期补油发酵生产沙利霉素工艺。

  

背景技术

沙利霉素是一种聚醚类一元羧酸抗生素，具有特殊的环状结构，是典型的离子载体抗生素。沙利霉素是由白色链霉菌(Streptomysis albus)产生的聚醚类离子载体型动物专用抗生素, 由于其广谱高效的抗球虫病性能而得到广大饲养者的认可。

目前沙利霉素的生产主要通过生物发酵的方法进行，主要以豆油作为其主要的发酵碳源，例如中国专利CN1230596A公开的，但是随着近年来油的价格持续上升，沙利霉素的发酵成本相应有了很大的提高；并且由于油的自身特性，发酵基质中过多油的积累会造成发酵体系溶氧的降低，同时其还会附着于菌丝体表面，不利于菌体代谢，甚至还会出现发酵液结块的现象，对后期处理造成困难。

2005年8月《山东大学学报（理学版）》第40卷第4期“盐霉素发酵补油工艺研究”中公开了一种菌体产素期补油的工艺，该文献虽然优化了补油工艺，即减少初始发酵培养基中的豆油含量，并在发酵过程中以豆油、脂肪酸含量分数和豆油消耗速率为指标进行补油，但是若不能使菌体代谢活力维持在一个较高的水平，依然会造成菌体对油的利用率不高，从而导致发酵水平的低下。因此，如何在菌体生长期增强菌体的代谢活力是提高发酵产量的关键因素。

 

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种发酵生产沙利霉素工艺，菌体生长期补糖菌体产素期补油，可使沙利霉素效价提高的同时降低生产成本。

一种发酵生产沙利霉素工艺，其特征在于包括以下工艺步骤：

发酵培养：将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有培养基的发酵罐，接种量8-12%，培养温度30-35℃,压力0.04-0.06MPa，DO控制在30%-100%,转速250-500rpm；发酵进行30-50小时开始补加糖，控制发酵液中还原糖含量为3-10g/l；发酵进行到80-120小时，开始补加植物油，控制发酵液中脂肪酸含量为1-5wt%；发酵进行290-310h放罐。

本发明所述的菌体产素期是在发酵的次级代谢中产生沙利霉素的时间段。

当发酵进行到30-50小时，培养基中的还原糖含量降低，不利于菌体的生长，本发明采用在此时间段内补加糖来促进菌体的进一步生长，根据糖浓度控制补糖速率，糖浓度控制在3-10g/l。80-120小时，菌体进入次级代谢，需补加植物油来提高发酵效价，本发明在此时间段内开始采用连续流加方式补油，根据脂肪酸含量控制补油速率，脂肪酸浓度控制在1-5wt%。

作为优选，所述的斜面培养是：将菌株接种到斜面培养基上，26-30℃下培养6-8天。

作为优选，所述斜面培养基的组成是：可溶性淀粉1-3 wt%，硫酸镁 0.02-0.08 wt%，氯化钠 0.02-0.08 wt%，牛肉膏 0.05-0.2 wt%，硝酸钾0.05-0.2 wt%，磷酸氢二钾 0.02-0.08 wt%，亚硫酸铁 0.0005-0.0015 wt%，琼脂 1-3wt%，余量的蒸馏水；所述斜面培养基的pH 值为6.5-7.5。

作为优选，所述的种子培养是：将经斜面培养所得孢子接入种子培养基，在30-35℃、220-260 r/min的条件下培养25-30h。

作为优选，种子培养基的组成是：葡萄糖 2-8 wt%，黄豆粉2-4 wt%，酵母粉 0.5-2wt%，轻质碳酸钙 0.1-0.4 wt%，余量的蒸馏水。

作为优选，发酵罐中培养基的组成是：蔗糖2-6 wt%，棕榈油 2-8wt%，氯化钾 0.1-0.4wt%，氯化钠 0.05-0.2 wt%，豆粕粉 0.1-0.8 wt%，胚芽粉 0.2-1wt%，磷酸氢二钾 0.01-0.02wt%，硫酸镁 0.005-0.02 wt%，乳化剂 0.02-0.08wt%，硫酸铵 0.1-1wt%，轻质碳酸钙 0.1-0.5 wt%，余量的蒸馏水；所述发酵液的pH值为6.5-7.0。

作为优选，所述糖为蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉的一种或多种。

作为优选，所述植物油为棕榈油、豆油、菜籽油的一种或多种。

作为优选，所述补糖方式为连续流加，根据还原糖浓度控制补糖速率，还原糖浓度控制在3-10g/l。

作为优选，所述补油方式为连续流加，根据脂肪酸含量控制补油速率，脂肪酸浓度控制在2-4wt%。

作为优选，本发明在发酵进行到38-42小时，开始补加糖。