[发明专利]一种从林蛙残皮制备胶原海绵的方法

权利要求书

1.本发明涉及一种从林蛙残皮制备胶原海绵的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：

a)干燥：将经醇提处理的蛙皮残渣低温干燥；

b)酸酶提取：在冰醋酸提取缓冲液中加入蛋白酶和蛙皮残渣；

c)酶灭活：加入EDTA灭活蛋白酶；

d)纯化：抽滤获得滤液，盐析沉淀，蒸馏水透析过夜；

e)冻干：将透析后的胶原蛋白溶液用紫外线辐射，冷冻干燥，获得胶原海绵。

2.根据权利要求1a所述的干燥，其特征在于干燥温度低于40℃。

3.根据权利要求1b所述的酸酶提取，其特征在于冰醋酸浓度0.5M，提取缓冲液∶蛋白酶∶蛙皮残渣＝50∶20∶1(mL∶mg∶g)，37℃提取48h。

4.根据权利要求1c所述的酶灭活，其特征在于EDTA终浓度为20mM。

5.根据权利要求1d所述的纯化，其特征在于硫酸铵浓度为0.1g/L。

6.根据权利要求1e所述的冻干，其特征在于紫外线波长254-365nm，工作距离5-10cm，辐照时间1-4h，冷冻温度-40℃。