[发明专利]一种从蚕体提取的墨蝶呤的鉴定方法有效
申请号: | 201210133303.1 | 申请日: | 2012-05-02 |
公开(公告)号: | CN102650621A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 孟艳;王文静;王敬;高俊山;刘朝良 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人: | 余成俊 |
地址: | 230036 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 蝶呤 鉴定 方法 | ||
1.一种从蚕体提取的墨蝶呤的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、将蚕体的体壁按照料液比1:20加入50%乙醇匀浆,煮沸10min左右,离心,浓缩,经ECTEOLA纤维素柱分离得到两种色素,即色素A和色素B,分别将两种色素依次经Sephadex G-25-150柱和磷酸纤维素柱纯化,最后得到两种色素的高纯度粉末;
(2)、将墨蝶呤标准品和两种提取的色素的高纯度粉末分别溶于2ml超纯水中,用0.45um滤膜过滤,滤液供试;
(3)、色谱条件:用ODS C18色谱柱,选用超纯水、浓度>99.9%的甲醇和浓度>99.9%的冰乙酸的混合液为流动相,将流动相用0.45um膜过滤,超声脱气20min,流速为1ml/min,柱温为25℃,进样量20ul,检测波长为420nm;
(4)、按照(3)中的色谱条件平衡系统,平衡至基线漂移小于0.01mV/min,噪声小于0.001mV;待系统平衡好后,分别进样分析墨蝶呤标准品和两种提取的色素,通过样品的保留时间对墨蝶呤进行鉴定分析。
2.根据权利要求1所述的一种对从蚕体提取的墨蝶呤进行鉴定的方法,其特征在于:步骤(3)的ODS C18色谱柱规格为250mm×4.6mm,填料粒度为5um。
3.根据权利要求1所述的一种对从蚕体提取的墨蝶呤进行鉴定的方法,其特征在于:步骤(3)的超纯水、99.9%甲醇、99.9%冰乙酸的体积比为79.5:20:0.5。
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