[发明专利]一种螺旋藻多糖及其提取方法有效
申请号: | 201210134354.6 | 申请日: | 2012-05-03 |
公开(公告)号: | CN102633901A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 丁侃;李俊;姚健;倪鑫淼 | 申请(专利权)人: | 昆明振华制药厂有限公司;中国科学院上海药物研究所 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P35/00;A61P3/10;A61P37/04;A61P39/06 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 金耀生 |
地址: | 650000 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 螺旋藻 多糖 及其 提取 方法 | ||
1.一种螺旋藻多糖的提取方法,其特征在于按以下步骤进行:
1)取螺旋藻生药材,加质量浓度 95%工业乙醇室温下浸泡七天,倾去乙醇,固体物晾干,然后用沸水进行多次提取,每次提取时间为4小时,用苯酚-硫酸法检测提取液的糖含量,至糖反应不明显为止,每次的提取液经过滤后合并,加热浓缩至小体积,对流动水透析2天,透析内液浓缩后离心,加入质量浓度30%的三氯乙酸(体积比,1:1 v/v)溶液去除蛋白,在4度条件下反应4小时,加质量浓度10% NAOH溶液v/v中和至pH值为6.5~7.5后,扎袋对流动水透析48小时,透析内液浓缩后离心,上清液加入三倍体积的质量浓度95%工业乙醇,静置过夜,离心收集沉淀,分别经无水乙醇和丙酮洗涤后,于80 ℃干燥,得水提螺旋藻粗多糖;
2)沸水提取后的固体残渣在4 ℃下用5% v/v NaOH溶液浸提3小时,间歇搅拌,过滤,用10% v/v HCl溶液中和至pH 6.5~7.5,扎袋对流动水透析2天,透析内液浓缩后离心,上清液加入三倍体积的 v/v 95%工业乙醇沉淀,静置过夜,离心收集沉淀,分别经无水乙醇和丙酮洗涤后,于80 ℃干燥,得碱提螺旋藻粗多糖;
3)水提螺旋藻粗多糖用DEAE-纤维素阴离子交换柱层析进行分离,用去离子水和不同离子强度0.1,0.2,0.3和0.5 mol/L的NaCl溶液进行分步洗脱,分别从去离子水、0.1、0.2,0.3和0.5 mol/L NaCl溶液的洗脱液中分离得到五个组分,洗脱液对去离子水透析,透析内液减压浓缩并冷冻干燥,所得产物分别命名为LXZ-W,LXZ-0.1,LXZ-0.2,LXZ-0.3,LXZ-0.5,取LXZ-W样品用0.2mol/L氯化钠溶解,离心,上清液上S-300凝胶柱,用0.2 mol/L氯化钠洗脱液洗脱得LXZ-W-300组分,经HPLC检测为一纯多糖,分子量在3~10 × 104 Da。
2.一种用权利要求1所述的螺旋藻多糖的提取方法提取得到的螺旋藻多糖,其化学结构特征为:主链由1, 4-连接α-D-葡萄糖构成,平均每8个主链残基上有一个分支,取代在分支点的6位,分支由1个或2个1?6连接的葡萄糖构成,结构式如下:
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