[发明专利]一种解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶发酵的方法无效

专利信息
申请号: 201210135058.8 申请日: 2012-05-04
公开(公告)号: CN102634501A 公开(公告)日: 2012-08-15
发明(设计)人: 张斌 申请(专利权)人: 苏州百趣食品有限公司
主分类号: C12N9/54 分类号: C12N9/54;C12R1/07
代理公司: 江苏致邦律师事务所 32230 代理人: 王伟
地址: 215000 江苏省苏州市*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 淀粉 芽孢 杆菌 凝乳 发酵 方法
【权利要求书】:

1.一种解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶发酵的方法,其特征在于,在100 mL摇瓶中配制一定体积的发酵培养基,接入一定量的解淀粉芽孢杆菌种子液,在恒温振荡器中培养温度24~38℃,摇瓶转速60-260 r/min,然后进行凝乳活力和蛋白水解活力的测定。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,种子培养基: 马铃薯葡萄糖肉汤培养基:马铃薯浸粉0. 5%,葡萄糖2%,蛋白胨1%,NaCl 0. 5%,121℃灭菌20 min。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,发酵培养基: 马铃薯浸粉0. 5%,葡萄糖1.13%,酵母浸粉1. 76%,CaCO3 0. 32%,121℃灭菌20 min。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于解淀粉芽孢杆菌接种量为3.5%。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于培养温度为36℃。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于摇床转速为120 r/min。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于最佳装液量为25 mL。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于培养基初始pH为6.0。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于凝乳活性的测定方法为,取5 mL 100 g/L 的脱脂乳,40℃保温5 min 后加入0. 5 mL经适当稀释的发酵液混合,振荡使它们混合均匀;准确记录从加入酶液到乳凝固的时间( s);凝乳酶活力( milk-clotting activity,MCA )定义为:40 min 凝固1 mL 10%脱脂乳的酶量为1 个酶活力单位( Soxhelt Unit,Su);MCA = ( 2400×5×D) / ( T×0. 5)式中: MCA 为凝乳酶活力/ ( Su/mL);T 为凝乳时间/s;D 为稀释倍数。

10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于蛋白水解活力的测定方法为:底物是牛乳全酪蛋白,用pH 6.5 0.1M 磷酸盐缓冲液配制2% 酪蛋白溶液,1 mL 底物溶液加入0.1 mL 酶液,在40℃ 孵育1 h,立即加入1.1 mL 0. 4 M TCA 溶液终止反应,涡旋混匀后在室温下放置20 min,然后12000 r/min 离心10 min,上清液中多肽含量用Lowry 法测定;一个酶活力单位定义为每分钟生成100 μg 多肽所需的酶的量。

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