[发明专利]转基因大豆A2704-12转化事件的检测方法和试剂盒无效
| 申请号： | 201210135582.5 | 申请日： | 2012-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN102634595A | 公开（公告）日： | 2012-08-15 |
| 发明（设计）人： | 于常海;刘乐庭;杨滨 | 申请（专利权）人： | 海康生物科技（北京）有限公司;北京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 冯琼;李玉秋 |
| 地址： | 100176 北京市大兴*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 转基因 大豆 a2704 12 转化 事件 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测转基因大豆A2704-12转化事件的方法，其包括以下步骤：
(a)将样品DNA 95℃变性后立即冰置，使用特异性识别A2704-12外源DNA区的特异引物对，在RNA聚合酶的作用下转录生成RNA；所述引物之一包含所述RNA聚合酶的识别序列；
(b)使用上述特异引物对，对上述所得RNA进行NASBA扩增，得RNA扩增产物；
(c)分别设计捕获探针和检测探针，对上述RNA扩增产物进行检测。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述RNA聚合酶为T7RNA聚合酶。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述引物对分别包含SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示核苷酸序列。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述引物对序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述捕获探针包含SEQ ID No.7所示序列，所述检测探针包含SEQ ID No.8所示序列。
6.一种检测转基因大豆A2704-12转化事件的NASBA检测试剂盒，其特征在于，包括特异性识别A2704-12外源DNA区的引物对，RNA聚合酶，以及可特异性与上述引物对介导的NASBA扩增产物杂交的捕获探针和检测探针，所述引物之一包含所述RNA聚合酶的识别序列。
7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对分别包含SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示核苷酸序列。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述引物对序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。
9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述捕获探针包含SEQ ID No.7所示核苷酸序列，所述检测探针包含SEQ ID No.8所示核苷酸序列。
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