[发明专利]植物耐旱耐碱相关的DNA片段及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域中的一种植物耐旱耐碱相关的DNA片段及其应用。

背景技术

“有收无收在于水”，目前干旱已成为困扰世界粮食生产的主要问题之一。干旱对植物造成的伤害是多方面的，影响植物的各种生理过程。近年来人们通过各种方法鉴定和定位了很多与抗旱相关的基因，并通过基因工程的方法，获得了一些在一定程度上抗旱的转基因植物，但是，随着全球气候的恶化，要从根本上大幅度地提高作物的抗旱性，避免减产甚至由于农作物的死亡而造成的绝收，就必须找到更多能够抗严重干旱的基因，确定它们在抵御干旱和脱水中的功能，分析它们之间的协同作用与调控特点，才能更有效地应用于提高作物抗旱性的育种和栽培。因此，这种能够忍耐极度干旱的植物资源成为了研究的目标。寻找抗严重干旱的基因，研究基因间互作和调控机制，培育优质的抗旱性转基因农作物，不仅是提高我国粮食生产的需要，也是抵御美国廉价转基因作物的战略需求。

更苏植物能够忍耐极度干旱的环境，萎而不死，以类似于休眠的方式度过不良环境，在水分充足的条件下又可以恢复正常生长。但是，大多数更苏植物是比较低等的苔藓、裸子植物，亲缘关系与粮食作物距离相对较远，抗旱机制也比较特殊，在转基因技术上存在很大的困难。旋蒴苣苔(Boea hygrometrica(Bunge)R.Br)属于苦苣苔科旋蒴苣苔属，是更苏植物中少有的在我国分布的被子植物之一。旋蒴苣苔具有分布广、适应性强（耐旱、耐热、耐碱、耐高钙）和基因组小等特点。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种DNA片段，该DNA片段的名称为Bh1-4，来源于旋蒴苣苔(Boea hygrometrica(Bunge)R.Br)，可用于培育耐旱耐碱转基因植物，所述DNA片段为如下1）-4)DNA分子中的任意一种：

1）由序列表序列1中第7位至第6375位核苷酸序列组成的DNA分子；

2）与1）限定的DNA的序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性的DNA分子；

3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA序列杂交的DNA分子；

4）序列表序列1的第7位至第6375位核苷酸序列所示DNA片段中的任意一段具有转录水平调控元件功能的DNA分子，或由序列表序列1的第7位至第6375位核苷酸序列所示DNA片段中的任意一段具有编码植物耐逆性相关蛋白的功能的DNA分子或具有产生非编码RNA功能的DNA分子；所述调控元件可为启动子或增强子，所述非编码RNA可为siRNA或miRNA；

所述耐逆性为耐旱性和/或耐碱性。

序列表序列1由6381个碱基组成，其中，第1位至第6位核苷酸序列和第6376位至6381位核苷酸序列为限制性内切酶BamH I的识别序列。

所述严格条件可为如下：50℃，在7％十二烷基硫酸钠（SDS）、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，2×SSC，0.1% SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，1×SSC，0.1% SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.5×SSC，0.1% SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％ SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.1×SSC，0.1% SDS中漂洗；还可为：50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在65℃，0.1×SSC，0.1%SDS中漂洗；也可为：在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1% SDS和1×SSC，0.1% SDS各洗膜一次。

含有所述DNA片段的重组载体、表达盒、转基因细胞系、重组菌或重组病毒也属于本发明的保护范围。