[发明专利]甘蓝型油菜OGU CMS恢复系及其转育方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于油菜杂种优势利用研究领域，尤其涉及一种甘蓝型油菜恢复材料及其转育方法和应用。 

背景技术

Ogura（1968）创建的萝卜细胞质雄性不育（Ogu CMS），具有不育性稳定、易于保持等显著特点，被公认为是整个芸苔作物中最为理想的杂种优势利用途径。在甘蓝型油菜应用研究中，Bannerot（1974）最先利用回交法育成了甘蓝型油菜Ogu CMS，该不育类型因质核不协调，存在叶色低温缺绿、蜜腺缺乏等不良特征。Pelletier（1983）以甘蓝型油菜与萝卜进行原生质体融合，育成了新一代Ogu-INRA CMS，既保持了原有的不育稳定性，又克服了叶色缺绿等问题。其后的研究发现，整个芸苔属作物中找不到Ogu CMS恢复基因，恢复基因仅存在于日本或欧洲的萝卜品种中。Heyn（1976）尝试通过有性杂交将萝卜恢复基因导入到甘蓝型油菜，获得育性部分恢复的Ogu CMS F₁属间杂交种，Pelletier（1983）从甘蓝型油菜与萝卜的原生质体融合胞质杂种中，获得了甘蓝型油菜性状的Ogu CMS恢复株。由于导入到甘蓝型油菜中恢复基因伴有一定长度的萝卜染色体片段，并且伴有恢复材料结实率低、农艺性状差，与高硫苷基因紧密连锁等系列问题，优良纯合型恢复材料转育极为困难。Primard-Brisset（2000）通过辐射处理重组恢复基因，减少了萝卜片段对恢复材料的影响，甘蓝型油菜Ogu CMS成为最具潜力的油菜杂种优势利用技术之一。 

中国于上世纪70年代末引入甘蓝型油菜Ogu CMS，在恢复材料转育方面，李旭峰（2001）曾将萝卜变种蓝花子中的恢复基因导入到甘蓝型油菜Ogu CMS，并获得附加染色体恢复材料Ad-6，纯合型甘蓝型油菜Ogu CMS恢复材料筛选一直没有取得明显进展。目前世界各国对育成的Ogu CMS恢复材料均实施专利保护，创建新型的Ogu CMS恢复材料（源）对扩大甘蓝型油菜Ogu CMS的应用范围有着重要作用。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种成本低、安全性好、可用于甘蓝型油菜Ogu CMS授粉体系中的甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系，还提供一种操作简单、直观、效果明显、具有重要遗传意义的甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系的转育方法，同时相应提供该甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系在甘蓝型油菜Ogu CMS授粉体系中的应用。 

为解决上述技术问题，本发明创建了一种恢复基因原始亲本来源不同的甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系及由该恢复系通过回交、自交转育后获得的系列衍生恢复材料，所述甘蓝型油菜 Ogu CMS恢复系在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.6003，其植株名称为Ogu CMS恢复系CLR650。本发明的甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系CLR650是于2012年4月16日交由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）保藏，保藏单位的地址位于北京中国科学院微生物研究所。 

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述甘蓝型油菜Ogu CMS恢复系的转育方法，包括以下步骤： 

（1）嫁接导入外源萝卜恢复基因：以甘蓝型油菜Ogu CMS叶色缺绿不育系（Brassica Napus.L）和含Ogu CMS外源恢复基因的十字花科资源作为嫁接亲本，嫁接时以所述Ogu CMS叶色缺绿不育系的不育株作为接穗，所述十字花科资源的可育株作为砧木，接穗成活开花时，取砧木的可育花粉与接穗的不育花进行杂交，获得导入有萝卜染色体的甘蓝型油菜远缘杂交后代；所述萝卜染色体上携有恢复基因；本步骤的方法能有效克服远缘杂交生殖性障碍，平均结角率为16%左右，平均结实率达17%左右，相对其它远缘外源基因的导入方法，本步骤的嫁接操作有着更直接、更简便的导入效果；