[发明专利]一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗

权利要求书

1.一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：其由狂犬疫苗和破伤风类毒素组成，所述狂犬疫苗由人用二倍体细胞WI-38接种CDKHBP-1毒株纯化得到。

2.根据权利要求1所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：所述破伤风类毒素的量为5～9LF/剂。

3.根据权利要求1所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：所述狂犬疫苗由以下方法制得：

1)  人二倍体细胞的复苏、扩增培养；

2)  在人二倍体细胞上接种CDKHBP-1毒株；

3)  收获病毒液，灭活、浓缩；

4)  纯化。

4.根据权利要求3所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：所述纯化包括以下步骤：

1)  超滤纯化；

2)  蔗糖密度区带离心；

3   Sepharose4FF柱层析纯化；

4)  佐剂吸附，加保护剂人血白蛋白。

5.根据权利要求3所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：步骤1）中细胞培养液为199培养液，且该细胞培养液中含牛血清的体积分数为2～10%、卡那霉素或庆大霉素26～30U/ml，并调pH至7.0～7.5，其培养温度为35～37℃，扩增培养方式为转瓶培养、细胞工厂培养、微载体反应器培养中的一种。

6.根据权利要求3所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：灭活采用?-丙内酯灭活，用截留10万～30万的超滤器浓缩疫苗，浓缩至20倍以上。

7.根据权利要求4所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于： 所述纯化的具体方法为：加入适量的PBS冲洗，再浓缩到原倍数，再加入适量的PBS冲洗反复6～7次；再经过蔗糖密度梯度离心，用38%和45%（W/W)的蔗糖密度梯度，21000～24000rpm超速离心4小时，经紫外吸收峰的抗原含量，蛋白浓度的分析，确定病毒所在位置，再经Sepharose4FF柱层析纯化。

8.根据权利要求4所述的一种人用预防狂犬病和破伤风的疫苗，其特征在于：所述佐剂为纳米氢氧化铝。