[发明专利]植物籽粒中脂肪酸含量气相色谱测定方法

说明书

技术领域

本发明属于测量技术领域，尤其涉及一种植物籽粒中脂肪酸含量气相色谱测定方法。

背景技术

脂肪分为动物脂肪和植物脂肪。脂肪是由脂肪酸和甘油化合而成的天然高分子化合物，广泛分布于自然界中。油脂作为三大营养成分之一，同样质量的油脂中贮存的脂肪产生的能30量相当于碳水化合物或蛋白质的2.25倍[1]。研究表明，身体最直接的能量来源是在三羧酸循环中被脂肪酶从甘油三酯释放出来的脂肪酸。人体除了红血球和某些神经中枢系统外，均能直接由脂肪作为能量来源。脂肪的这一功能对于重体力劳动者、非常规情况下的野外作业者及难民、灾民等食物供应上应作为优先考虑的营养素。能量作为影响婴幼儿和青少年生长发育的首要因素，脂肪的供给量也显得尤为重要。人体的生理机能的正常运行，离不开脂肪酸的参与，有些脂肪酸在人体可以通过蛋白质和碳水化合物等转化而来，而有些是不能转化的，就要从然产物中直接获取。如亚油酸和DHA(二十二碳六烯酸)及花生四烯酸，油酸的缺乏会使人体生长缓慢以及皮肤易受损害等；DHA及花生四烯酸对儿童的大脑生长发育具有极其重要的作用，是必需的脂肪酸。作为占植物油比例95-96％的脂肪酸部分决定了食用油脂主要的营养功能。从化学角度讲，植物油中95％以上是脂肪酸甘油三酯并伴有少量的类脂物质。类脂物质包括脂肪酸、甘油一脂、甘油三脂、磷脂、甾醇、维生素、色素、萜烯类、脂肪醇、烃类等，个别油脂中还含有棉酚、芥子甙或芝麻酚。世界各地消费植物油脂的种类也不同，地中海附近地区的人偏爱橄榄油，美国人主要食用豆油、玉米油和棉籽油，在欧洲的部分地区以花生油为主要食用油，中国人主要食用豆油。不同油脂的脂肪酸组成千差万别，如油菜的脂肪酸中芥酸含量可高达50％以上，而其它油料作物一般不含芥酸，芥酸对人体是有害的。油脂的脂肪酸组分不同，对人体的健康有着直接的影响，所以对食物脂肪酸组分的测定有着十分重要的意义。

发明内容

本发明就是针对上述问题，提供一种测定简便、快速、准确的植物籽粒中脂肪酸含量气相色谱测定方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案，本发明包括如下步骤：

(1)称取研碎的样品0.5g于15mL刻度试管中，加入5mL乙醚+石油醚(1+1)混合液，在涡旋振荡器上涡旋1min，混合均匀，超声波浸提10min，放置1h，加入5.4％KOH甲醇溶液2mL，在涡旋振荡器上涡旋1min，超声20min，放置反应1h，加入水10mL，静置分层，取上层有机相上机测定。

(2)分别准确称取脂肪酸甲酯标样100mg，于37个5ml容量瓶中，用正己烷定容配成20mg/ml的单标储备液；移取各脂肪酸甲酯单标储备液各1ml于50ml容量瓶中正己烷定容，配成浓度为0.4mg/ml的脂肪酸甲酯混合标准溶液。

(3)载气为高纯氮气；恒流模式，流速1mL/min，尾吹气流量：30mL/min；H2流速：40mL/min，空气流速：400mL/min，进样量：1μl，分流比：1∶100；进样口温度：250℃：检测器温度：270℃柱温采用三级程序升温：90℃ 7℃/min190℃ 3℃/min 215℃(10min)20℃/min 230℃(5min)。用脂肪酸甲酯混合标准溶液定性，按面积百分比计算各脂肪酸的量。

本发明有益效果

用发明提出的乙醚+石油醚提取方法和KOH+甲醇甲酯化方法制备脂肪酸甲酯，衍生化反应快速完全，酯化效果高，方法简便，适用于处理大批量样品的测定。采用本发明的方法用于37种C4～C24及其不饱和脂肪酸的测定简便、快速、准确，得到的气相色谱图分离效果好，分辨率高，出峰完全，易于定性、结果准确可靠，对于检测脂肪酸含量有重要意义。

具体实施方式

本发明包括如下步骤：

(1)称取研碎的样品0.5g于15mL刻度试管中，加入5mL乙醚+石油醚(1+1)混合液，在涡旋振荡器上涡旋1min，混合均匀，超声波浸提10min，放置1h，加入5.4％KOH甲醇溶液2mL，在涡旋振荡器上涡旋1min，超声20min，放置反应1h，加入水10mL，静置分层，取上层有机相上机测定。

(2)分别准确称取脂肪酸甲酯标样100mg，于37个5ml容量瓶中，用正己烷定容配成20mg/ml的单标储备液；移取各脂肪酸甲酯单标储备液各1ml于50ml容量瓶中正己烷定容，配成浓度为0.4mg/ml的脂肪酸甲酯混合标准溶液。