[发明专利]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌IsdB蛋白活性片段的重组蛋白、及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 201210140382.9 | 申请日： | 2012-05-04 |
| 公开（公告）号： | CN102675433A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 曾浩;蔡昌芝;邹全明;卢陆;童文德;冯强 | 申请（专利权）人： | 重庆原伦生物科技有限公司;中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C07K14/31 | 分类号： | C07K14/31;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/085;A61P31/04;G01N33/68;C12R1/445;C12R1/19 |
| 代理公司： | 重庆志合专利事务所 50210 | 代理人： | 胡荣珲 |
| 地址： | 401121 重庆市北部新*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 isdb 蛋白 活性 片段 重组 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌铁离子表面决定蛋白IsdB的活性片段IsdB2重组蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3或在SEQ ID NO： 3的氨基端和/或羧基端添加或缺失若干个氨基酸后得到的与SEQ ID NO：3具有相同或相似功能的序列。
2.一种权利要求1所述IsdB2重组蛋白的重组表达载体，其特征在于，包含编码所述IsdB2重组蛋白的核苷酸序列以及载体序列。
3.如权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于，所述核苷酸序列为SEQ ID NO：4或在SEQ ID NO：4的一端或两端添加或缺失若干个核苷酸后得到的编码与SEQ ID NO：3所示蛋白具有相同或相似功能蛋白的序列。
4.如权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于，所述载体序列为pGEX-6p-2载体序列。
5.一种宿主菌，其特征在于，导入有权利要求2所述的重组表达载体。
6.一种表达权利要求1所述IsdB2重组蛋白的方法，其特征在于，包含以下步骤：
1）根据编码IsdB2重组蛋白的核酸序列设计正向引物和反向引物；
2）使用步骤1）设计的正向引物和反向引物，通过PCR扩增出编码IsdB2重组蛋白的基因片段；
3）将步骤2）所获得的基因片段克隆至表达载体，然后转化至宿主菌；以及
4）诱导转化后的宿主菌表达IsdB2重组蛋白。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤1）中所设计的正向引物和反向引物的核苷酸序列分别示于SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6。
8.权利要求1所述的IsdB2重组蛋白在制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的亚单位疫苗中的应用。
9.权利要求1所述的IsdB2重组蛋白在制备耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测试剂盒中的应用。
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