[发明专利]苦参碱在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于药物研究领域，具体涉及苦参碱在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病的药物中的新用途。

背景技术

阿尔茨海默氏病（AD）是一种以记忆和认知功能障碍为主要症状的多发于老年群体的神经退行性疾病，发病后较难治愈，目前主要的疗法只限于短期缓解发病症状。AD主要的病理学特征包括脑神经元外出现的β淀粉样蛋白（Aβ42）（其氨基酸序列参见中国专利201110094262.5中序列SEQ ID NO:1）的沉积和其进一步形成的老年斑（SP），细胞内过度磷酸化的Tau蛋白导致的神经纤维缠结和神经元的营养坏死等。很多证据表明Aβ42的寡聚化及形成的沉积很可能是AD发病的关键因素。Aβ42是由淀粉样前体蛋白（APP）经过β-分泌酶和γ-分泌酶先后切割而成，淀粉样蛋白级联假说认为Aβ42的产生和清除之间的平衡由于某种原因被破坏，Aβ42在脑内聚集而导致了一系列的细胞和分子的变化继而引起了神经机能的障碍和神经元的死亡，近来越来越多的研究工作支持Aβ42的寡聚体对神经具有更强的毒性，因此如何安全而有效地阻止甚至清除Aβ42寡聚体的毒性被认为是预防和治疗AD的一种有效的方法。

中药是中华文明历经千年流传下来的宝贵的文化遗产，中药中的天然化合物不仅来源具有生物多样性，而且代谢产物结构复杂多变，蕴含着无穷无尽的结构多样性。近年来我国研究者从多方面展开中药治疗老年痴呆的研究，但由于中药成分的复杂性，研究工作以临床报道居多，理论与实验研究少，许多临床观察诊断和疗效的评价不够严谨，客观，缺少针对性的理化和影像学检查等问题，使结果缺乏科学性和说服力。

天然药物中的一些活性成分诸如皂苷类、黄酮类、酚酸类、萜类、生物碱类、蒽酮类等，虽然针对AD的作用靶点不尽相同，在体外或临床研究显示具有不同程度的针对AD的治疗效果，但是由于有效成分多靶点、作用机理的不明确性、毒副作用难以评价、药效不稳定等特点，中药在治疗AD方面难以得到认可，从天然药物中通过高通连筛选出单体化合物，研究其药理作用，分析其作用机制，就可以为中药治疗AD赋予科学的内涵，为进一步临床应用和新药开发提供借鉴。

苦参碱（Matrine），即α-苦参碱，是一种来自苦参植物的生物碱，属于四环的喹嗪啶类，分子式为C₁₅H₂₄N₂O（化学结构式如下所示），分子量为248.37，无嗅，味苦，熔点为76℃，在乙醇、氯仿、甲苯和苯中极易溶解。众多基础及临床研究发现：苦参碱具有抗炎、免疫抑制、抗心率失常、抗病毒、抗寄生虫和镇静、镇痛等功效。

发明内容

本发明的目的是提供苦参碱在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病的药物中的新用途。

本发明利用Aβ42毒性诱导的细胞模型，发现苦参碱具有显著抑制或中和Aβ42单体或Aβ42寡聚体的细胞毒性的作用，进一步检测发现，苦参碱可以通过抑制Aβ42单体或Aβ42寡聚体的聚集来抑制Aβ42的神经毒性，从而确定了苦参碱在制备预防和治疗阿尔茨海默氏病药物中的新用途。

附图说明

图1：透射电子显微镜下Aβ42寡聚体（20μM，37℃，孵育12h）的形态图，比例标尺为100nm；

图2：苦参碱抑制或中和Aβ42单体和Aβ42聚集体细胞毒性的效应分析，其中1：苦参碱抑制组，2：苦参碱中和组，3：Aβ42单体损伤组，4：Aβ42寡聚体损伤组；

图3：苦参碱对Aβ42单体和Aβ42寡聚体的二级结构的影响，其中1：Aβ42寡聚体组，2：（Aβ42寡聚体+苦参碱）组，3：Aβ42单体组，4：（Aβ42单体+苦参碱）组；

图4：透射电子显微镜观察苦参碱对Aβ42单体和Aβ42寡聚体的聚集形态影响，其中1：Aβ42寡聚体组（37℃孵育12h），2：（Aβ42寡聚体+苦参碱）组（37℃孵育12h），3：Aβ42单体组（37℃孵育24h），4：（Aβ42单体+苦参碱）组（37℃孵育24h），比例标尺为100nm；

图5：硫磺素T（Th-T）法检测苦参碱对Aβ42单体和Aβ42寡聚体聚集状态的影响，其中1：Aβ42寡聚体组，2：（Aβ42寡聚体+苦参碱）组，3：Aβ42单体组，4：（Aβ42单体+苦参碱）组。

具体实施方式

实施例1：苦参碱抑制或中和Aβ42单体和Aβ42聚集体细胞毒性的效应分析

（1）Aβ42单体和Aβ42寡聚体的制备