[发明专利]一种螺旋藻γ-亚麻酸提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有高抗氧化活性和抗血小板聚集活性的螺旋藻γ-亚麻酸提取物及其制备方法，属于现代食品加工和生物技术领域。

背景技术

γ-亚麻酸被誉为“21世纪功能性食品的主角”，是人体中不可缺少的一种多不饱和脂肪酸。γ-亚麻酸作为各组织生物膜的结构材料，也是人体合成前列腺素的前体物质，具有抗脂质氧化、抗动脉粥样硬化、降低血清胆固醇浓度、增强免疫功能等多种重要的生理活性功能。

最近研究发现，被联合国粮农组织推荐的“21世纪最理想的食品”——螺旋藻是迄今发现的自养生物中唯一含有丰富的γ-亚麻酸的生物，含量高达11970mg/kg藻粉，占藻体脂肪酸类的20％-30％，其γ-亚麻酸含量可占其脂肪酸的8％-25％左右。而在γ-亚麻酸的主要提取来源月见草油中，γ-亚麻酸含量只在7％-10％。由此可见，螺旋藻是γ-亚麻酸非常有前途的来源，但未得到充分重视，国际上也只有少量研究。

目前国内对于螺旋藻γ-亚麻酸提取物制备的专利尚无记录，相关文献研究提到的提取方法主要集中在超临界二氧化碳萃取技术，尿素包合法等。但前者对设备要求高，且提取率并没有显著提高；后者有尿素残留，易形成可疑致癌物氨基甲酸乙酯，对于直接用于食品和保健品不太理想。因此，本发明选用安全易挥发的乙醇为有机提取溶剂，发明了一种安全有效、经济易操作的提取方式；同时通过研究γ-亚麻酸的体外活性，为螺旋藻来源的保健品的研发提供支持。

发明内容

本发明的目的是开发一种经济易操作，适合工业化生产的γ-亚麻酸的工艺流程，以弥补目前市场上对于螺旋藻γ-亚麻酸提取物制备的空白，从而深度开发我国丰富的螺旋藻资源，为营养保健品的研发提供技术支持。

为实现上述目的，本发明由以下步骤组成：

步骤一：将藻粉和乙醇按照1∶12～18(w/v)的比例混合，在0～40℃水中利用超声波进行细胞破碎，功率为400W，破碎时间为10～15min。如果时间较长，可采用分阶段破碎，每次5min，以防局部温度过高对内容物产生破坏；

步骤二：破碎后的藻粉-乙醇悬浮液继续恒温振荡提取，提取温度可在60～70℃间进行调节，提取时间为90～150min，注意避光；

步骤三：经溶剂浸提后的混合物先真空抽滤，得到的澄清液再利用真空浓缩除去多余溶剂；

步骤四：浓缩得到的提取物经真空冷冻干燥，可得到粉末状的螺旋藻γ-亚麻酸提取物，便于储藏和再利用；通过气象色谱定量分析后，得到提取效率(GLA/干重)可大于8.1g/kg(wt％)。

用此方法得到的螺旋藻γ-亚麻酸提取物，通过体外DPPH自由基清除实验、脂质氧化抑制实验和血小板聚集抑制实验验证其生物活性，证实具有良好的体外抗氧化和抗血小板聚集功效，可应用于保健食品开发领域。

附图说明

下面对附图进行简要说明。

图1是提取工艺图。

图2是γ-亚麻酸提取物的气相色谱图。横轴代表保留时间，纵轴代表峰面积。

图3是γ-亚麻酸对由ADP诱导的血小板聚集的抑制效果图，横轴表示GLA浓度(g/L)，纵轴表示抑制率(％)。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明的范围。

实施例1：

将5g干燥的螺旋藻粉，与60mL乙醇充分混合，先在冰水浴中利用超声波进行细胞破碎，功率为400W，破碎时间为10min。经破碎后的藻粉-乙醇悬浮液，继续在恒温水浴中避光浸提，保持温度70℃，振荡90min，转速150r/min。浸提得到的γ-亚麻酸提取物混合溶液，首先经过真空抽滤滤去残渣，澄清液转移至旋转蒸发仪(175Mbar，40℃)进行真空浓缩，从而除去多余溶剂。经浓缩得到的提取物再通过真空冷冻干燥，最终可得到白色粉末状的螺旋藻γ-亚麻酸提取物。

取10mL纯提取物用浓硫酸-甲醇(1∶9，v/v)在70℃恒温水浴中甲酯化10min，冷却后加入1mL正己烷及用蒸馏水定容，混匀后静置分层，取上层液体用于气相色谱检测，并根据标准曲线计算相应含量，得到提取效率(GLA/干重)可大于8.3g/kg(wt％)。

实施例2：