[发明专利]γ-分泌酶抑制剂的新用途以及一种提高真核细胞对CVB病毒易感性的方法

权利要求书

1.γ-分泌酶抑制剂（GSI）在制备加快CVB病毒感染细胞进程和增加病毒感染量的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于：所述γ-分泌酶抑制剂（GSI）为购自Merk公司的InSolution^TMγ-Secretase Inhibitor X，是一种白色粉末，溶于DMSO制成GSI溶液。

3.根据权利要求2所述应用，其特在于：所述GSI溶液工作浓度为100nM。

4.一种提高真核细胞对CVB病毒易感性的方法，是用γ-分泌酶抑制剂（GSI）处理所述真核细胞，再用CVB病毒感染该处理后细胞，使得CVB病毒感染真核细胞的进程和感染效果增强。

5.一种获得高感染量CVB病毒的方法，是用γ-分泌酶抑制剂（GSI）处理真核细胞，再用CVB病毒感染该处理后细胞，CVB病毒的感染量及滴度升高。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述用γ-分泌酶抑制剂（GSI）处理细胞的方法为：将细胞铺板，待细胞贴壁后，向细胞培养基中加入GSI溶液，使GSI在培养基中终浓度为100nM，5％CO₂恒温孵箱培养48h(48-72h均可)，期间每隔12h（12-24h均可）补加一次(与第一次加入的等量)GSI溶液。

7.根据权利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：所述CVB病毒感染细胞的方法为：细胞经GSI处理后，吸出细胞培养基，加入CVB病毒液，4℃孵育1h，然后将病毒液吸出，用PBS漂洗细胞以洗去未吸附在细胞上的病毒，加入含2％FBS的DMEM培养基作为病毒感染培养基，37℃孵箱培养1h-12h之间任何时间。

8.权利要求4或5或6或7所述的方法，其特征在于：所述真核细胞为是离体的，且为CVB易感细胞，优选上皮细胞，实验选择HeLa细胞。

9.根据权利要求4-8任一所述的方法，其特征在于：所述γ-分泌酶抑制剂（GSI）为购自Merk公司的InSolution^TMγ-Secretase Inhibitor X，是一种白色粉末。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：使用时γ-分泌酶抑制剂（GSI）溶于DMSO制成溶液，溶液工作浓度为100nM。