[发明专利]非人哺乳动物B淋巴细胞缺陷动物模型的制备方法及其用途

权利要求书

1.一种非人哺乳动物的B淋巴细胞缺陷动物模型的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)提供非人哺乳动物的细胞，将所述细胞中的Gpr97基因失活，得到Gpr97基因失活的细胞；

(2)利用步骤(1)中得到的Gpr97基因失活的细胞，制备得到Gpr97基因失活的B淋巴细胞缺陷动物模型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将Gpr97基因失活包括基因剔除、基因中断或基因插入。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述非人哺乳动物为啮齿动物或灵长目动物，较佳地包括小鼠、大鼠、猴。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)利用DNA同源重组技术，将所述Gpr97基因中的外显子1和2剔除，并用筛选标记替换，得到Gpr97基因突变的非人哺乳动物细胞；

(2)利用步骤(1)中得到的Gpr97基因突变的非人哺乳动物细胞制备得到嵌合非人哺乳动物；

(3)将步骤(2)中得到的嵌合非人哺乳动物和正常野生型非人哺乳动物交配繁育，在后代中筛选获得Gpr97基因突变的杂合子非人哺乳动物；

(4)通过将步骤(3)中得到的杂合子非人哺乳动物相互交配获得Gpr97基因突变的纯合子非人哺乳动物，从而得到Gpr97基因失活的非人哺乳动物模型。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述筛选标记为neo基因。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中得到的Gpr97基因失活的非人哺乳动物模型中，与野生型对照小鼠相比，其免疫系统的B淋巴细胞在该模型的外周血、骨髓和/或脾脏组织中的百分含量下降。

7.根据权利要求1-6之任一项所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，将该模型用于研究人或动物中Gpr97基因的生物学功能。

8.根据权利要求1-6之任一项所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，将该模型用于筛选或鉴定能增加免疫系统中B淋巴细胞百分含量的物质。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，将该模型用于筛选或鉴定能增加该模型的外周血、骨髓和/或脾脏组织中B淋巴细胞百分含量的物质。

10.一种筛选或鉴定B淋巴细胞缺陷治疗剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将候选物质施用于权利要求1所述方法制备的非人哺乳动物模型；和

b.检测所述动物模型的外周血、骨髓和/或脾脏组织中B淋巴细胞的百分含量；

其中，与对照相比，如果施用了候选物质的动物模型中所述B淋巴细胞的百分含量升高，则表明该候选物质是B淋巴细胞缺陷治疗剂。

11.一种G蛋白偶联受体97蛋白或其激动剂在制造用于增加免疫系统中B淋巴细胞百分含量的药物中的用途。