[发明专利]一种采用自克隆工程菌高效发酵生产L-山梨糖的方法有效
申请号: | 201210145148.5 | 申请日: | 2012-05-10 |
公开(公告)号: | CN102660599A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 陈坚;周景文;王小北;堵国成 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12P19/02 | 分类号: | C12P19/02;C12N15/53;C12N1/21;C12R1/01 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 王秀丽 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 克隆 工程 高效 发酵 生产 山梨 方法 | ||
1.一种采用自克隆工程菌高效发酵生产L-山梨糖的方法,其特征在于以氧化葡萄糖酸杆菌工程菌为生产菌株,接种到种子培养基中,500mL摇瓶装液50mL,于30°C、200rpm条件下培养20-24h;按15%的接种量将培养好的种子接入发酵培养基,30°C,200rpm条件下培养36h;所述氧化葡萄糖酸杆菌工程菌过量表达外源山梨醇脱氢酶基因,其构建方法为:通过化学全合成方法获得Genbank:NC_006677.1所示山梨醇脱氢酶基因,克隆到表达载体pBBR1MCS-2,进一步转化氧化葡萄糖酸杆菌获得自克隆基因工程菌。
2.根据权利要求书1所述的方法,其特征在于种子培养基组成为:山梨醇150g,酵母膏6g,CaCO3 2g,pH 4.8-5.1,自来水定容至1L。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于发酵培养基组成为:山梨醇250g,酵母膏2g,CaCO3 2g,pH4.8-5.1,自来水定容至1L。
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