[发明专利]H1N2亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测试剂盒有效
申请号: | 201210147569.1 | 申请日: | 2012-05-14 |
公开(公告)号: | CN102649985A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 谢芝勋;彭宜;刘加波;谢志勤;庞耀珊;邓显文;谢丽基;范晴 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 530001 广西*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | h1n2 禽流感 病毒 rt lamp 可视化 检测 试剂盒 | ||
1.检测或辅助检测H1N2亚型禽流感病毒的环介导等温扩增成套引物,由简并引物FIP-H1、简并引物BIP-H1、简并引物F3-H1、简并引物B3-H1、简并引物LF-H1、简并引物LB-H1、简并引物FIP-N2、简并引物BIP-N2、简并引物F3-N2、简并引物B3-N2、简并引物LF-N2和简并引物LB-N2组成,它们的核苷酸序列分别为序列表中的序列1、序列2、序列3、序列4、序列5、序列6、序列7、序列8、序列9、序列10、序列11和序列12。
2.根据权利要求1所述的成套引物,其特征在于:所述成套引物中,各简并引物的摩尔比为1.6μmol所述简并引物FIP-H1、1.6μmol所述简并引物BIP-H1、0.2μmol简并引物F3-H1、0.2μmol简并引物B3-H1、0.8μmol简并引物LF-H1、0.8μmol简并引物LB-H1、1.6μmol所述简并引物FIP-N2、1.6μmol所述简并引物BIP-N2、0.2μmol简并引物F3-N2、0.2μmol简并引物B3-N2、0.8μmol简并引物LF-N2和0.8μmol简并引物LB-N2。
3.检测或辅助检测H1N2亚型禽流感病毒的逆转录环介导等温扩增试剂或试剂盒,其特征在于:所述试剂或试剂盒均包括甜菜碱、dATP、dCTP、dGTP和dTTP、Mg2+和权利要求1或2所述的成套引物。
4.根据权利要求3所述的试剂或试剂盒,其特征在于:所述试剂或试剂盒中包括二套独立包装的试剂,分别为反应试剂A和反应试剂C;所述反应试剂A含有1.6μmol所述简并引物FIP-H1、1.6μmol所述简并引物BIP-H1、0.2μmol所述简并引物F3-H1、0.2μmol所述简并引物B3-H1、0.8μmol所述简并引物LF-H1、0.8μmol所述简并引物LB-H1、1mmol所述dATP、1mmol所述dCTP、1mmol所述dGTP、1mmol所述dTTP、6mmol所述Mg2+和1mmol所述甜菜碱;
所述反应试剂C含有1.6μmol所述简并引物FIP-N2、1.6μmol所述简并引物BIP-N2、0.2μmol所述简并引物F3-N2、0.2μmol所述简并引物B3-N2、0.8μmol所述简并引物LF-N2、0.8μmol所述简并引物LB-N2、1mmol所述dATP、1mmol所述dCTP、1mmol所述dGTP、1mmol所述dTTP、6mmol所述Mg2+和1mmol所述甜菜碱。
5.权利要求1或2所述成套引物在制备检测或辅助检测H1N2亚型禽流感病毒的环介导等温扩增试剂或试剂盒中的应用;进一步,所述检测或辅助检测H1N2亚型禽流感病毒的环介导等温扩增试剂或试剂盒具体可为权利要求3或4所述的试剂或试剂盒。
6.权利要求1或2所述成套引物、权利要求3或4所述的试剂或试剂盒的制备方法为下述1)或2):
1)权利要求1或2所述成套引物或权利要求3或4所述的试剂或试剂盒的制备方法,均包括将权利要求1或2所述成套引物中的所述简并引物FIP-H1、简并引物BIP-H1、简并引物F3-H1、简并引物B3-H1、简并引物LF-H1、简并引物LB-H1、简并引物FIP-N2、简并引物BIP-N2、简并引物F3-N2、简并引物B3-N2、简并引物LF-N2和简并引物LB-N2分别单独包装的步骤;
2)权利要求1或2所述成套引物或权利要求3或4所述的试剂或试剂盒的制备方法,均包括制备如下2个单独包装的步骤:
a)将权利要求1或2所述成套引物中的所述简并引物FIP-H1、简并引物BIP-H1、简并引物F3-H1、简并引物B3-H1、简并引物LF-H1、简并引物LB-H1按照所述比例混合在一起得到一个单独包装;
b)将权利要求1或2所述成套引物中的所述简并引物FIP-N2、简并引物BIP-N2、简并引物F3-N2、简并引物B3-N2、简并引物LF-N2、简并引物LB-N2按照所述比例混合在一起得到另一个单独包装。
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