[发明专利]一种Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于包含以下24个基因座的扩增引物核苷酸序列：DYS531：SEQ ID NO:1~2；DYS630：SEQ ID NO:3~4；DYS622：SEQ ID NO:5~6；DYS552：SEQ ID NO:7~8；DYS510：SEQ ID NO:9~10；DYS449：SEQ ID NO:11~12；DYS459a和DYS459b：SEQ ID NO:13~14；DYS446：SEQ ID NO:15~16；DYS443：SEQ ID NO:17~18；DYS635：SEQ ID NO:19~20；DYS587：SEQ ID NO:21~22；DYS527a和DYS527b：SEQ ID NO:23~24；DYS460：SEQ ID NO:25~26；Y–GATA-A10：SEQ ID NO:27~28；DYS520：SEQ ID NO:29~30；DYS557：SEQ ID NO:31~32；DYS522：SEQ ID NO:33~34；DYS481：SEQ ID NO:35~36；DYS570：SEQ ID NO:37~38；DYS385a和DYS385b：SEQ ID NO:39~40；DYS444：SEQ ID NO:41~42。

2.根据权利要求1所述Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于24个基因座的扩增引物浓度分别如下：

DYS531和DYS552：0.20μM；DYS630：0.25μM；DYS622：0.40μM；DYS510、DYS443和DYS635：0.80μM；DYS449：0.35μM；DYS459a和DYS459b：0.55μM；DYS446：0.70μM；DYS587：1.50μM；DYS527a、DYS527b和DYS520：1.35μM；DYS460：0.55μM；Y-GATA-A10：1.60μM；DYS557：1.55μM；DYS522：1.20μM；DYS481：1.85μM；DYS570、DYS385a和DYS385b：2.00μM；DYS444：3.00μM；

所述引物浓度均为上、下游引物的浓度。

3.根据权利要求2所述Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于每个基因座对应的引物中至少有一条序列的5’端进行荧光染料标记，荧光染料标记物为6-FAM、HEX、TAMRA或ROX中的任意一种。

4.根据权利要求2所述Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于24个基因座的扩增引物核苷酸序列分为4组，分别进行5’端荧光染料标记：

第一组：DYS531、DYS630、DYS622、DYS552、DYS510和DYS449，荧光染料标记物为6-FAM、HEX、TAMRA或ROX中的任意一种；

第二组：DYS459a、DYS459b、DYS446、DYS443、DYS635、DYS587、DYS527a和DYS527b，荧光染料标记物为6-FAM、HEX、TAMRA或ROX中第一组未使用的任意一种；

第三组：DYS460、Y –GATA-A10、DYS520、DYS557和DYS522，荧光染料标记物为6-FAM、HEX、TAMRA或ROX中第一组和第二组均未使用的任意一种；

第四组：DYS481、DYS570、DYS385a、DYS385b和DYS444，荧光染料标记物为6-FAM、HEX、TAMRA或ROX中前三组均未使用的任意一种。

5.根据权利要求4所述Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于试剂盒内设有内标，内标用SIZ作为橙色荧光标记物。

6.根据权利要求4所述Y染色体STR基因座荧光检测试剂盒，其特征在于试剂盒内还包括反应混合液和热启动Taq酶，所述反应混合液组成为：MgCl₂ 7.5mM, Tris-HCl 125mM，KCl 125mM，dNTPs 7.5mM，BSA 2g/L。