[发明专利]一种快速提取DNA的方法无效
申请号: | 201210151773.0 | 申请日: | 2012-05-16 |
公开(公告)号: | CN102676503A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 龚敬文;梁少明;任维 | 申请(专利权)人: | 亚能生物技术(深圳)有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人: | 张明 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区西*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 提取 dna 方法 | ||
1.一种快速提取DNA的方法,其特征在于,由以下步骤组成:
a、将蛋白沉淀试剂、裂解试剂和含有DNA的生物样本依次加入容器混合均匀,使细胞内容物得以释放,蛋白质发生凝聚,得到含从生物样本释放的DNA组分和非DNA组分的裂解液,所述蛋白沉淀试剂为多价金属盐溶液;
b、将步骤a中得到的裂解液中的DNA与非DNA组分分离,得到纯化的DNA溶液。
2.根据权利要求1所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述步骤b为:
b、将步骤a中得到的裂解液通过离心分离得到含DNA组分的上清液,上清液转移至硅胶柱过滤后,DNA结合到硅胶柱内,洗涤和洗脱后,获得分离的纯化的DNA溶液。
3.根据权利要求2所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,由以下具体步骤组成:
a、将100ul的0.5M的硫酸锌溶液、500ul的裂解试剂,所述裂解试剂为BufferAP1、200ul全血加入1.5ml离心管,剧烈振荡30秒,得到含DNA组分和非DNA组分的裂解液;
b、将步骤a中得到的裂解液12000rpm离心10分钟;上清液转移至硅胶柱,12000rpm离心30秒;加入700ul Buffer W1A,12000rpm离心30秒;加入800ulBuffer W2,12000rpm离心30秒;再次加入500ul Buffer W2,12000rpm离心3分钟;加入150ul Buffer TE,放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集滤液为分离的纯化的DNA溶液。
4.根据权利要求2所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述多价金属盐为钙盐、镁盐、钡盐、铅盐、锌盐、铁盐、锰盐、锡盐、钴盐、铜盐中的一种。
5.根据权利要求4所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述多价金属盐溶液的溶质浓度为0.5-2M。
6.根据权利要求2所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述的裂解试剂包括离液盐,所述离液盐选自胍盐、尿酸、碘化钠或高氯酸钠中的一种。
7.根据权利要求6所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述离液盐的溶质浓度为3-6M。
8.根据权利要求2所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述的生物样本选于全血、尿液、血清、白膜层、骨髓、淋巴细胞、血小板、体液或脱落细胞。
9.根据权利要求2所述的快速提取DNA的方法,其特征在于,所述的非DNA组分包括蛋白质、脂类、RNA和糖类。
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