[发明专利]诊断试剂盒及CCDC49在制备胃癌早期诊断试剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物科学领域，特别涉及一种诊断试剂盒及CCDC49在制备胃癌早期诊断试剂中的应用。

背景技术

胃癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤，根据世界卫生组织（WHO）2008年的统计（世界卫生组织年度统计，2008），在全世界范围，胃癌病人的死亡率高居第二。在2006年WHO的统计中显示有接近950,000个新发病例，同时有约700,000人死于这一种疾病。在我国，每年胃癌新发患者数超过30万，死于胃癌的人数约16万，病死率居恶性肿瘤之首，严重威胁人民生命健康(陈竺,全国第三次死因回顾抽样调查报告,2008)。为降低死亡率，提高胃癌的疗效，关键是胃癌的“三早”工作，即早期发现、早期诊断及早期治疗。然而，由于绝大多数胃癌患者缺乏特异性的临床症状，故早期胃癌诊断率很低，手术率不足10%（吴云林：外科理论与实践，2005，10:401）；术后病人的生存期也较短。目前，我国胃癌总体5年生存率为43．4％，术后病理分期(pathological TNM，pTNM)I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的术后5年生存率分别为75．65％、58．73％、28．Ol％和8．42％（刘炳亚:中华胃肠外科杂志,2010,13:163）。因此，提高胃癌的早期诊断率非常重要。而一般体检和影像学检查作用有限，待能够发现和明确诊断时，往往已到了中、晚期，缺少预警价值。因此，从长远角度看，应致力于发现敏感性和特异性均较好的肿瘤标志物。此外，胃癌异质性大，预后及对治疗的反应性差别较大，对于临床评估预后以及对治疗反应性的预测与评价，均需良好的肿瘤标志物。

理想的肿瘤标志物应符合以下条件：（1）敏感性高；（2）特异性高；（3）肿瘤标志物浓度和肿瘤大小、转移、恶性程度有关，能协助肿瘤分期和判断预后；（4）半衰期短，有效治疗后浓度很快下降，能较快反映体内肿瘤的实际情况；（5）存在于体液，特别是血液中,易于检测(刘炳亚:中华胃肠外科杂志,2010,13:163)。

肿瘤血清标志物的研究一直是本领域的研究重点。现已有多种胃癌肿瘤标识物：如癌胚抗原（CEA），存在于胃癌及其它腺癌患者的血清中，但对早期胃癌的诊断意义较小，主要用于胃癌治疗前后的动态观察(Lipkin M:Cancer Research,1988,48:235；Lipkin:JBC Supplymental,1992,16:1)；CA125、CA19-9、CA50、CA724以及CA242等部分糖抗原在部分胃癌患者中可升高，但其敏感性仅20～40％（Kodera Y:The American journal of gastroenterology,1996,91:49；Chou M:Disease Markers,2000,16:105；Lai IR etal:Hepato-gastroenterology,2002,49:115；Edip U et al:Advances in Theray,2008,25:1075）；还有研究发现肿瘤相关糖蛋白抗原-72（TAG-72）对胃癌的敏感性为69%，特异性为84％（刘军等：实用医学杂志，1999，15:4）；糖蛋白抗原MG7-Ag在血清中有40％-60％的阳性检出率，在胃癌组织中有80％-94％的阳性检出率（Ren J:Cancer，2000，88：280）；核小体组蛋白类抗原(IPO—38)作为胃癌诊断的敏感性为57.4%，特异性超过90%（Hao Y etal:J Proteome Res,2008，7:3668）以上这些指标均有利于早期胃癌的诊断。某些肿瘤基因，如DDC、c-myc、c-erb-2、p53以及nm23等对胃癌的发生、转移也有一定意义，但广泛应用于临床仍受限制（刘倩等，人民卫生出版社，2004）。由于现有的胃癌生物标识物在灵敏度和特异性上的缺陷，虽然在疗效监测、提示复发、判断预后和高危人群的普查中具有一定的价值，但目前仍不能用于胃癌的确诊。为了实现对胃癌的早期高灵敏性，高特异性的诊断，急需在分子水平上寻找到更敏感、更特异的胃癌生物标志物。

我们在前期研究中利用人蛋白质组芯片高通量、快速分析的优势，分析了胃癌病人相关血清101份（胃癌病人37份、高危病人14份、健康人血清50份），在较短时间内比较了患者和健康人样品中的不同，给出了候选血清生物标志物，以期早期诊断和有效治疗胃癌。