[发明专利]一种奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，以奶山羊基因组DNA或包含PITX2基因的DNA序列为模板，以PCR引物对P为引物，扩增奶山羊PITX2基因，然后利用限制性内切酶RsaI对PCR产物进行酶切，

再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据电泳结果鉴定奶山羊PITX2基因第543位的单核苷酸多态性：TT基因型表现为432bp一条条带；TC基因型表现为432bp，320bp和112bp三条条带；CC基因型表现为320bp和112bp两条条带；

所述的引物对P为：

上游引物：tcgtccatga actgcatgaa aggc；

下游引物：aaaggaaggg aggtcagggt cgtaat。

2.如权利要求1所述的奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：

95℃预变性5min；35个循环（94℃变性30s，55.9℃退火30s，72℃延伸30s）；72℃延伸10min。

3.如权利要求1所述的奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶电泳为1.0%琼脂糖凝胶电泳。

4.如权利要求1所述的奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，将奶山羊PITX2基因第543位SNP位点的TT和TC基因型作为有效DNA标记。

5.如权利要求4所示的奶山羊PITX2基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的DNA标记为：

TT和TC基因型作为奶山羊泌乳性状的标记辅助选择育种中提高奶山羊乳脂含量同时降低乳糖含量、乳浓度的DNA标记。

6.奶山羊PITX2基因第543位的单核苷酸多态性中的TT和TC基因型作为奶山羊泌乳性状的标记辅助选择育种中提高奶山羊乳脂含量同时降低乳糖含量、乳浓度的DNA标记的应用。