[发明专利]一种微生物肥料颗粒剂的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明是通过枯草芽孢杆菌液体深度发酵技术，生产出枯草芽孢杆菌发酵菌液，同时混合腐植酸与活性污泥造粒，形成具有生物活性的微生物肥料。 

背景技术

微生物肥料通过其中所含微生物的生命活动，增加了植物元素的供应量，并通过细菌自身在植物体内或根系土壤周围繁殖，改善植物的微生态环境，既能达到增产作用，又能拮抗某些病原微生物的致病作用，通过提供营养和减轻作物病害而导致产量增加的效果。 

本发明涉及的枯草芽孢杆菌PGPR-802，于2012年4月24日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 6048，分类命名为bacillus subtilis。PGPR-802是一种高耐盐性，好氧和兼性好氧，对热、pH和盐浓度具有广泛多样性生存适应能力的细菌，枯草芽胞杆菌的发酵过程中，能够吸收利用多种无机元素，使植物必须微量元素的生物整合成为可能，另外枯草芽胞杆菌在植物上应用功能全面优越，能够强壮植株，减少农药残留，生态环保提高食品安全性，还能产生抑菌肽和乳酸，抑制和减轻植物细菌和真菌病害。枯草芽胞杆菌有效菌为芽胞，保质期长，商品性好，能长期在市场流通。 

多年以来，微生物肥料的加工都是采用其他行业如兽药、酶制剂、谷氨酸发酵行业的副产物，多数加工方式只采用成品菌剂与填料混合，缺少发酵代谢产物，另外烘干过程温度过高，微生物损耗严重，严重影响了微生物肥料产品的肥效，本发明生产工艺从根本上解决了这些问题，该微生物肥料的田间肥效有了很大的提高。 

发明内容

枯草杆菌菌种的活化 

将保存在-20℃冰箱中的菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基试管内，37℃恒温培养24h；

一级种子的制备

配制牛肉膏蛋白胨摇瓶培养基，用500mL三角瓶分装，装液量200mL，高压灭菌后接入活化后的枯草杆菌，37℃，220r/min培养24h；

二级种子的制备

配制种子罐培养基，培养基组合如下：酵母粉 0.3%，蛋白胨1%,氯化钠 0.5%，葡萄糖1%。将摇床培养的种子培养基按5%比例接入500L种子罐， 37℃,180r/min，通气比1:1.5培养24h；

发酵罐的培养

发酵罐培养基配方比例如下：蛋白胨0.5%，酵母粉0.5%，葡萄糖2%，玉米浆1%，NaCl 0.2%，调pH 7.5，35℃,200r/min，通气比1:1培养至产生芽胞为止；

含菌量检测

采用稀释平板法检测发酵完成的含菌量；

原料混配

 将腐植酸与活性污泥按4:5的比例混合搅拌均匀；

圆盘造粒

将混合好的物料上圆盘造粒机造粒，同时喷雾添加10%的发酵菌液粘结造粒；

低温烘干

采用蒸汽加热滚筒夹套至70℃，通过引风机将水汽带出，烘干水分至20%以下。

检验 

烘干后的产品取样按国标GB20287-2006的要求检测有效菌数、杂菌率、水分等指标。

包装 

将检验合格的产品包装成20-40kg/袋即为成品。

应用实例

应用实例1   于2011年4月-2011年8月，我单位委托山东省青州市土壤肥料站在青州市何官镇北口埠村番茄种植区，以番茄为供试作物进行了小区试验，试验分三个处理，每个处理重复三次，每小区种植面积30m²,处理1为基施本发明加追肥，处理2基施灭活基质加追肥，处理3 为追肥对照。

实验结果显示，本发明在番茄上处理一比对照增产368.9kg/亩，增产10.4%。 

表1   应用本发明在番茄上做肥效小区试验结果 

应用实例2   于2011年4月-2011年9月，我单位委托在青州市何官镇口埠村，以苹果为处理对象进行了小区试验，试验分为三个处理，每个处理重复三次，每小区处理苹果树10棵，处理1常规施肥加本发明，处理2为常规施肥加灭活基质，处理3常规施肥 。

结果表明：施用本发明增产效果显著，处理一比对照组增产368.9kg/亩，增产率7.3%。 

表2 应用本发明在苹果上做肥效小区试验结果 

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