[发明专利]辛弗林的新应用

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，尤其涉及辛弗林在制备神经介素U 2受体激活剂中的应用。

背景技术

神经介素U (Neuromedin U，NMU）是一种神经调节肽，不同物种的NMU具有不同的形式，人的NMU（Neuromedin U-25）由25个氨基酸组成，广泛分布在下丘脑、脑回、垂体和延髓等中枢神经系统以及胃肠道和泌尿生殖系统等外周器官中，同时在胎盘、前列腺、脾脏、淋巴组织和脂肪组织中也均有所表达。

NMU的主要生理功能表现为刺激平滑肌收缩、抑制摄食、调节能量平衡、抑制胃酸分泌、延缓胃排空和参与下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节等多种功能。1985年，NMU首次发现和分离于猪的脊髓中，并因其对子宫平滑肌的收缩作用而命名。之后，研究者发现，向下丘脑注射NMU，可迅速降低大鼠的摄食量，而向中枢注射抗NMU的血清能够增加大鼠的摄食量，且NMU基因敲除的小鼠表现为肥胖，运动量降低。后来通过进一步研究发现，NMU的摄食行为和能量平衡调节作用是通过下丘脑特异性核团进行的。

神经介素U2受体(Neuromedin U2 Receptor，NMU2R)主要分布在大脑中枢神经系统的特定区域，尤其在黑质、延髓、脑桥的网状结构、脊髓和丘脑，在海马、下丘脑和大脑皮质也有大量的分布。NMU2R在一些脑区的特殊区域，如海马的CAI脑区、下丘脑的特异性核团室旁核和第三脑室壁均有高效的表达。NMU2R能识别NMU并与之结合，并能把识别和接受的信号正确无误地放大并传递到细胞内部，进而引起生物学效应，因此认为NMU对中枢神经系统的生理作用是通过NMU2R来介导的。NMU2R的这一生理功能使其可以作为调节能量代谢药物的作用靶点。

辛弗林，英文名为Synephrine，又称辛佛宁，对羟福林，辛内福林，交感醇，脱氧肾上腺素。辛弗林为白色结晶粉末，有苦味，分子式为C₉H₁₃NO₂，分子量为167.21，熔点184℃-185℃，易溶于水，其分子结构式如下：

辛弗林主要存在于芸香科柑橘属(Citrus)植物及其栽培变种的干燥幼果或果皮中，常用中药陈皮、青皮、枳壳和枳实均为该属植物果皮或果实。据文献报道，辛弗林是枳实中起主要药理作用的有效成分，并且《中国药典》一部2010年版中也以辛弗林作为枳实的质控指标。中医药书记载，积实有破气消积，化痰散痞，理气宽中，行滞消胀等功效。现代药理研究表明辛弗林为肾上腺素α受体兴奋剂，对心脏β受体也有一定的兴奋作用，其主要药理作用是收缩血管、升高血压、扩张气管和支气管，还能够提高新陈代谢、增加能量水平、氧化脂肪。目前辛弗林临床主要用于治疗支气管哮喘及手术和麻醉时低血压、虚脱及休克、体位性低血压等。辛弗林是21世纪天然兴奋剂，无任何副作用和阳性反应，广泛用于医药、食品、饮料等保健行业。但是，至今尚未见到有关辛弗林可激活NMU2R的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供辛弗林的新应用，即辛弗林在制备神经介素U2受体激活剂中的应用。

本发明首先通过NMU2R细胞及阴性对照细胞，检测辛弗林的NMU2R活性。

NMU2R细胞是能够稳定表达内源配体NMU、且在受到NMU2R激动剂刺激后剂量依赖地表达荧光素酶的一种稳定细胞株。NMU2R细胞是由NMU2R表达质粒（NMU2R-pCDNA3.1+）和报告基因质粒(3×MRE/3×CRE/SRE-Luciferase/pGL3)按1:5比例共转染到HEK293细胞中后筛选所得。NMU2R细胞受到待测样品作用后，可通过检测荧光素酶的响应值来判断待测样品是否对NMU2R有激活效应。

阴性细胞是由不含NMU2R的空载体质粒（pCDNA3.1+）和报告基因质粒(3×MRE/3×CRE/SRE-Luciferase/pGL3)按1:5比例共转染到HEK293细胞中后筛选所得。该细胞在受到NMU2R的内源配体NMU作用后，其荧光素酶响应值与对照组一致，所以称这种不表达NMU2R的细胞为阴性细胞。阴性细胞可用来判断待测样品对NMU2R的激活效应不是通过载体质粒和相应元件(3×MRE/3×CRE/SRE）起作用的。

在一个具体实施方式中，本发明在NMU2R细胞株和阴性细胞株培养液中加入辛弗林，比较报告基因的表达。结果显示，辛弗林在NMU2R细胞株中激活报告基因大量表达，而在阴性细胞株中不激活报告基因表达，证明辛弗林对NMU2R具有激活效应。