[发明专利]一种高速逆流色谱法从党参中分离党参生物碱单体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及杂环化合物，具体涉及从中药材党参中分离党参生物碱单体的方法。

背景技术

党参为桔梗科（Companulaceae）植物党参植物Codonopsis pilosula(Franch)Nannf.、素花党参Codonopsis pilosula Nannf. Var.modesta(Nannf.)L.T.Shen或川党参Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根。党参是一味传统补气中药，味甘，性平，具有健脾补肺，益气生津之功效，主治脾胃虚弱，食少便溏，四肢乏力，肺虚咳喘，气短自汗，气血两亏诸证。在我国盛产于甘肃、山西、陕西、四川、贵州、云南等地。近年来，文献报道党参中吡咯烷类生物碱具有改善心肌缺血、同时增强PGI₂合成和抑制血小板活性的功能，临床上治疗冠心病心绞痛具有较好疗效。

目前文献报道的，用于从党参中分离党参生物碱单体的方法为柱层析法，如大孔树脂柱层析法、硅胶柱层析法、氧化铝柱层析法和硅烷键合硅胶反相材料柱层析法。柱层析法的不足之处是：分离周期长，回收率低，分离效果很不理想。

关于党参生物碱单体的提取方法也有文献报道,如蔡东胡等发表的“党参的酚苷和吡咯烷生物碱”（Tung-Hu Tsai,Lie-Chwen Lin,Chem.Pharm.Bull.,56：492-496(2008)），公开号为CN1789244A的专利申请。但是，上述文献所公开分离方法均为柱层析法，其步骤冗长、繁琐，耗时长、纯度与得率均较本发明制得的低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种高速逆流色谱法从党参中分离党参生物碱单体的方法，该方法不仅效率高，而且所得到的党参生物碱单体的纯度高。

本发明解决上述问题的技术方案如下：

一种高速逆流色谱法从党参中分离党参生物碱单体的方法，该方法包括以下步骤：

1）取党参药材，切片，用乙醇溶液温浸提取，过滤，回收溶剂后减压浓缩得到浸膏，然后将所得浸膏用质量百分浓度1-5%的酸水溶液溶解，调节pH值至9-11后用有机溶剂连续萃取3~6次，合并萃取液，蒸干，得到党参总生物碱；

2）将高速逆流色谱两相溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀、静置分层，平衡后，将上、下相分离；其中所述的高速逆流色谱两相溶剂体系是体积比为1-4︰1-3︰0.5-2︰1-8的脂肪醇：脂肪酸酯︰脂肪醇︰水或体积比为1-4︰1-4︰1-2的氯仿︰脂肪醇︰水；

3）将步骤1）所得到的得到党参总生物碱用适量的步骤2）所述的下相溶解，制得进样样品；

4）取上相作固定相，以20~25ml/min流速填充满整个逆流色谱仪中的色谱柱，并设定恒温循环器温度为25℃；以700~900rpm转速开启逆流色谱仪主机后取下相作流动相，并以2~3ml/min流速泵入色谱柱内，待流动相平衡后由进样阀进样；根据检测器图谱收集目的组分，分别减压蒸干，乙醇重结晶，得到党参碱、党参次碱和管花党参碱。

本发明所述的方法，其中，所述的步骤4）还包括高效液相色谱检测步骤，该步骤是将所收集目的组分先进行高效液相色谱检测，并合并特征峰位置相同、形状相似的目的组分，再分别减压蒸干，乙醇重结晶，以减少后续鉴别化合物的工作量；其中所述的高效液相色谱检测条件为：色谱柱为规格是5μm,4.6mm×250mm的Kromasil RP-C₁₈，柱温为25℃；流动相是体积比为5︰95︰0.01的乙腈︰水︰三乙胺；流速为1.0ml/min；紫外检测器的检测波长为232nm。

本发明所述的方法，其中所述的乙醇溶液是体积浓度为60~100%的乙醇。

本发明所述的方法，其中所述溶剂体系在25℃下的黏度低，显著提高了固定相保留值，进而使溶质峰分离度良好（参见图1～3），所得到党参碱、党参次碱和管花党参碱的纯度高达95%以上。

附图说明

图1是下述实施例1所得到的高速逆流色谱图。

图2是下述实施例2所得到的高速逆流色谱图。

图3是下述实施例3所得到的高速逆流色谱图。

图4是下述实施例1所得到的组分a的高效液相色谱图。

图5是下述实施例1所得到的组分b的高效液相色谱图。

图6是下述实施例1所得到的组分c的高效液相色谱图。

具体实施方式

实施例1

一、党参生物碱单体的分离