[发明专利]基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法

权利要求书

1.基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法，其特征在于： 

（1）、对利用St?ber法合成的二氧化硅纳米粒子进行表面功能基团的修饰，与抗体进行偶联后用牛血清白蛋白进行封闭，得到二氧化硅纳米探针：

将乙醇、水、氨水和正硅酸乙酯按照50:1:1.7:1.5~50:3:4:4的体积比混合，在20°C~40°C条件下搅拌反应4~15小时，通过TEOS的水解和缩聚得到尺寸为60 nm~150 nm的二氧化硅纳米粒子；

将二氧化硅纳米粒子与3-氨丙基三乙氧基硅烷在20°C~60°C条件下搅拌反应1~12小时，对二氧化硅纳米粒子进行表面氨基化修饰，之后与10%的戊二醛按照4:1~3:2的体积比在20°C~37°C条件下搅拌反应2~24小时，进行醛基功能基团的修饰，再先后与660 nM的抗体溶液和10 mg/ml的牛血清白蛋白溶液在4°C~37°C条件下反应1~48小时；

（2）、在金基底上固定抗体，并用牛血清白蛋白进行封闭：

将清洗后的金基底浸入到硫辛酸乙醇溶液中10~48小时，之后浸入到1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺的绝对乙氰溶液中5~24小时或者1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺与N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐的磷酸盐缓冲液中30分钟~12小时进行生物功能化，再将其泡入抗体溶液中，在4°C~37°C条件下孵化1~48小时，然后与10 mg/ml的牛血清白蛋白溶液在4°C~37°C条件下反应1~48小时；

（3）、二氧化硅纳米探针俘获分析物之后，和金基底上固定的抗体形成三明治结构的免疫组装芯片；

（4）、将免疫组装芯片进行彻底的清洗，吹干后根据测得的傅里叶变换红外反射吸收光谱中是否有二氧化硅的红外指纹信号检测分析物：

如果红外反射吸收光谱中能观察到二氧化硅位于1075 cm^-1和1260 cm^-1左右的TO和LO声子模式对，则表明存在相应的分析物，反之亦然。

2.按照权利要求1的基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法，其特征在于：所述的抗体用单链DNA替换，所述的分析物用相应的可进行特异性识别的DNA、蛋白生物分子进行替换。

3.按照权利要求1的基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法，其特征在于：直接利用二氧化硅的可读取信号进行免疫分析。

4.按照权利要求1的基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法，其特征在于：利用二氧化硅位于1075 cm^-1和1260 cm^-1左右的TO和LO声子模式对作为红外指纹信号进行免疫分析。

5.按照权利要求1的基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法，其特征在于：免疫组装芯片的傅里叶变换红外反射吸收光谱在60°至85°的入射角下获得。

6.按照权利要求1的基于二氧化硅纳米粒子的红外吸收性质的免疫分析方法在生物检测中的应用。