[发明专利]一种多因素联合刺激致紧张性高血压动物模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种多因素联合刺激致紧张性高血压动物模型的制备方法，该模型可用于治疗高血压中药的筛选、药理研究及药效评价。

背景技术

人体中引起高血压的原因很多，其中心理因素也是原因之一。美国纽约西奈山医学中心也指出，精神压力是高血压和心血管疾病形成的一个致病因素，长期处于紧张、易怒、情绪不稳等精神压力下，容易产生高血压，病理机制尚不清楚。目前尚没有规范地通过多因素刺激造成的紧张性高血压动物模型的报道。而在药理实验中找到一个接近人类高血压形成病机的高血压大鼠模型，寻找引发人体高血压的确切因素及相应的症状指标，从而找到对人体高血压更有效的药物，显得尤为重要。

本发明根据日常生活中，人体高血压并发症诱因，如通过外界刺激、打乱生物钟等因素，建立了一种可用于治高血压中药的筛选、药理研究及药效评价的动物模型。

发明内容

本发明的目的是建立一种用于治疗高血压中药筛选、药理研究及药效评价的生活性高血压动物模型的制备方法。为了解决上述技术问题，本发明通过以下技术方案实现：在正常SD大鼠的基础上，模型组大鼠通过束缚、力竭游泳以及长期光照等综合因素刺激，持续8～17周，造成紧张性高血压动物模型。

其特征是模型筛选指标主要为收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均压(MBP)，以收缩压(SBP)为主，同时测血清中肌酐(Cr)、钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、总钙(T-Ca)的离子含量为辅，监测长期多因素联合刺激对大鼠血压及肾等脏器功能影响。

具体实施方式

实施例1

1实验材料与仪器

1.1动物SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。许可证号SCXK(浙)20080033，由浙江省实验动物中心提供。

1.2仪器ALC-NIBP无创血压测量分析系统(上海奥尔科特生物科技有限公司)；荷兰威图SELECTRA-E全自动生化仪(荷兰威图公司)；Powerwave340酶标仪(美国Bio-TEK公司)；DH-500K/Na/Cl/Ca/pH电解质分析仪(深圳百康立科技有限公司)。

1.3试剂肌酐(Cr)(上海复星长征医学科学有限公司)；A定标/冲洗液、B斜率定标液、去蛋白清洗液，武汉中达生物传感技术有限公司制造。

2实验方法

2.1造模SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，20只。10只作为正常对照组，10只为模型造模组。模型造模组每天上午束缚，束缚每一周循序加量1次，时间分别为0.5，1，1.5，2，2.5，3h，以3h束缚持续几周。下午力竭游泳，晚上打乱生物钟(长期光照)，17周。实验期间，正常组和模型组大鼠均自由饮水，正常进食。

2.2测定指标于造模的0周、6周、17周分别测大鼠收缩压、舒张压、平均压；于造模的5周、8周、10周、12周，分别禁食10h后采血，采用生化法测定肌酐、钾、钠、氯、总钙含量。

2.3统计分析计量资料数据以表示，组间比较采用t-test检验；计数资料采用X²检验。

3实验结果

3.1造模因素对SD大鼠血压的影响

由表1可知，与正常对照组相比，造模第17周时，模型造模组大鼠收缩压(SBP)明显升高(P＜0.01)。

表1收缩压血压统计表n＝10)

注：与正常对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表2可知，与正常对照组相比，17周时，模型造模组大鼠舒张压(DBP)明显升高(P＜0.01)。

表2舒张压血压统计表n＝10)

注：与正常对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

由表3可知，与正常对照组相比，17周时，模型造模组大鼠平均脉压(MBP)明显升高(P＜0.01)。

表3平均脉压统计表n＝10)

注：与正常对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01

3.2造模因素对SD大鼠血清中肌酐(Cr)的影响

由表4可知，与正常对照组相比，12周时模型造模组大鼠血清中肌酐(Cr)明显升高(P＜0.05)，提示12周时，模型组大鼠有肾组织损伤。

表4肌酐(Cr)统计表n＝10)