[发明专利]一种梨叶片诱导不定芽再生植株的方法无效
| 申请号： | 201210164216.2 | 申请日： | 2012-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN102668984A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 张绍铃;薛亚男;吴俊;陶书田;齐开杰 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;傅婷婷 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 叶片 诱导 不定 再生 植株 方法 | ||
1.梨叶片不定芽再生诱导的方法，其特征在于通过如下步骤实现：
（1）选取试管苗健康幼嫩的叶片，用无菌刀片垂直于叶片中脉横切2～4个伤口，叶片背面朝下接种于不定芽诱导培养基上，暗培养20~32天后转到光下培养；培养温度25±2℃；所述的不定芽诱导培养基为：NN69+TDZ 1.0~3.0mg/L+IBA 0.2~0.5mg/L+蔗糖30~50g/L+琼脂5.0~6.5g/L,PH值为5.8；
（2）待叶片长出不定芽后，将不定芽转接到增殖培养基上，在光照强度1500-2000lx，光照14~18h/d，温度25±2℃的培养条件促进其抽茎生长，从而获得茎干粗壮的试管苗；所述的增殖培养基为：1/2MS+6-BA1.0~2.0mg/L+IBA0.2~0.5mg/L+GA31.5~3.0mg/L+蔗糖25~40g/L+琼脂5.0~6.5g/L，培养基pH值为5.8；
（3）待试管苗长到2.5~3.5cm将苗接到生根培养基中，暗处理7~10d后再转光下培养，50-60天后得到生根苗；所述的光下培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照14~18h/d，温度25±2℃；生根培养基为：1/2MS+IBA 0.5~0.9mg/L+蔗糖50~70g/L+琼脂5.0~6.5g/L，培养基pH值为5.8。
2.根据权利要求1所述的梨叶片不定芽再生诱导的方法，其特征在于步骤（1）选取试管苗健康幼嫩的叶片，用无菌刀片垂直于叶片中脉横切2～4个伤口，叶片背面朝下接种于不定芽诱导培养基上，暗培养20~32天后转到光下培养；培养温度25±2℃；所述的不定芽诱导培养基为：NN69+TDZ 2.0mg/L+IBA 0.3mg/L+蔗糖40g/L+琼脂6.0g/L,PH值为5.8。
3.根据权利要求1所述的梨叶片不定芽再生诱导的方法，其特征在于步骤（2）待叶片长出不定芽后，将不定芽转接到增殖培养基上，在光照强度1500-2000lx，光照16h/d，温度25±2℃的培养条件促进其抽茎生长，从而获得茎干粗壮的试管苗；所述的增殖培养基为：1/2MS+6-BA1.5mg/L+IBA 0.2mg/L+GA32.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，培养基pH值为5.8。
4.根据权利要求1所述的梨叶片不定芽再生诱导的方法，其特征在于步骤（3）待试管苗长到2.5~3.5cm将苗接到生根培养基中，暗处理7~10d后再转光下培养，50-60天后得到生根苗；所述的光下培养条件为：光照强度1500-2000lx，光照14~18h/d，温度25±2℃；所述的生根培养基为：1/2MS+IBA 0.6mg/L+蔗糖60g/L+琼脂6g/L，培养基pH值为5.8。
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