[发明专利]水稻MYB家族转录因子OsMYB84基因编码序列及其应用有效
申请号: | 201210165148.1 | 申请日: | 2012-05-25 |
公开(公告)号: | CN102676544A | 公开(公告)日: | 2012-09-19 |
发明(设计)人: | 明凤;张文政;吕波;李春雨;金津 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/68;C07K14/415;A01H5/00 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻 myb 家族 转录 因子 osmyb84 基因 编码 序列 及其 应用 | ||
1. 一种分离出的DNA分子,其特征在于,为从水稻中克隆出的基因,记为OsMYB84,全长1209bp,其中开放阅读框为966bp,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
2. 一种如权利要求1所述的基因OsMYB84编码的蛋白质分子,其特征在于,该序列编码321个氨基酸残基,分子量35.339kDa,等电点为7.76,氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
3. 一对用于调取获得水稻样品中基因OsMYB84的引物序列,其特征在于,根据权利要求1所述基因OsMYB84设计,序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
4. 一对用于构建pCAMBIA1304-OsMYB84载体的引物序列,其特征在于,根据权利要求1所述基因OsMYB84开放阅读框设计,含有BglⅡ/SpeⅠ酶切位点,序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。
5. 一种检测水稻基因OsMYB84mRNA表达模式的方法,其特征在于利用权利要求1所述基因OsMYB84的核苷酸序列作为设计探针引物的保守区段,调取其序列的引物序列见SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8,对水稻cDNA样品进行Real-time PCR, 然后检测该基因在花、茎、叶、根中的表达;样品为水稻的RNA 经过逆转录后所得cDNA;其步骤如下:
提取水稻不同器官的总RNA;利用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA ,利用引物SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8,进行定量PCR检测。
6. 一种检测水稻在低温、干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后,基因OsMYB84表达含量变化的方法,其特征在于具体步骤为:将水稻进行低温、干旱、高盐胁迫以及植物激素处理后,提取水稻的总RNA;利用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA ,利用引物SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8,进行定量PCR检测。
7. 一种检测水稻Nipponbare在转入基因OsMYB84后,水稻中基因OsMYB84表达含量变化的方法,其特征在于具体步骤为:提取转入OsMYB84基因和野生型对照组水稻的总RNA;利用反转录试剂盒将总RNA反转录成cDNA,利用引物SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8,进行定量PCR检测。
8. 如权利要求1所述的水稻基因OsMYB84在植物品种改良中的应用。
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