[发明专利]多肽活性物质冻干粉的制备方法

权利要求书

1.一种多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

①取新鲜的健康动物四肢骨，剔除残肉及结缔组织，用纯化水清洗干净；

②将步骤①得到的四肢骨破碎，按骨与盐水重量比1：1-5，加入酸化NaCL溶液，提取温度为120-125℃， 压力为0.1-0.12MPa，提取结束后过滤，按滤渣与盐水重量比1：1-5，加入酸化NaCL溶液搅拌后，按上述温度和压力条件提取，过滤，合并两次提取液，待提取液冷却至5℃左右，静置、过滤除去上层脂肪；

③将步骤②得到的去脂肪后的提取液以及两次滤液缓慢加入1.5-3倍体积、预冷至0℃左右的丙酮中，静置、过滤，滤液于20-35℃减压浓缩并除去丙酮；

④将步骤③得到的浓缩液，添加浓缩液体积的0.1-3%的H₂O₂，用酸溶液调pH至2-3，于5-10℃进行液固分离，滤液用碱溶液调pH至8-10，再于5-10℃进行液固分离，滤液用酸溶液调pH至6.8-7.2后，按滤液重量加0.1-0.3%针剂用活性碳，煮沸后抽滤；

⑤将步骤④得到的滤液进行高纯度过滤，滤液冷冻干燥，包括三个阶段：-34℃预冻2-4h、-20℃左右低温升华16-24h和30℃左右高温干燥6-10h，得多肽活性物质冻干粉。

2.根据权利要求1所述的多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤①中所述的动物四肢骨为猪四肢骨以及胎牛四肢骨。

3.根据权利要求1所述的多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤②中所述的酸化NaCL溶液是指在NaCL溶液中加入HCL进行酸化，NaCL溶液浓度为0.1-0.8%，酸化后的溶液pH值为4.5 -6.5。

4.根据权利要求1所述多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤④中所述双氧水的溶液浓度为25-30%。

5.根据权利要求1所述多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤④中所述液固分离，是于5-10℃至少静置10h，采用过滤进行液固分离，或在5-10℃，4000r/min离心除去沉淀。

6.根据权利要求1所述多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤④中所述酸溶液为盐酸溶液、所述的碱溶液为氢氧化钠溶液。

7.根据权利要求1所述多肽活性物质冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤⑤中所述的高纯度过滤是指采用0.45μm以下过滤，再用0.22μm以下微孔滤膜抽滤，或采用5-10KD超滤。