[发明专利]一种四环二萜类化合物及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及杀虫剂和抑菌剂领域，具体地说是一种海藻内生真菌来源的四环二萜类化合物及其制备和应用。

背景技术

二十世纪以来，化学合成农药的大量使用对水体和土壤带来了严重的污染，超过2/3的农药直接渗透到环境中，残留非常严重，对生物和人类健康都造成直接和潜在的危害。随着人们对食品安全重视程度的日益提高，无公害生物源农药的开发利用逐步受到重视。与化学合成农药相比，生物源农药具有环境兼容性好，不易产生抗性等优点，其开发应用对人类健康、环境保护和农业的可持续发展都具有极其重要的意义。

细菌性疾病仍然是人类重要的疾病类型。致病性大肠杆菌为革兰氏阴性短杆菌，通过污染饮水、食品等引起疾病暴发流行，病情严重者，可危急生命，常作为饮水和食物(或药物)的卫生学标准。金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性细菌的代表，为侵袭性细菌，能产生毒素，作为人类的一种重要致病菌，可引起多种严重感染。由于微生物的变异速度比较快，并不断产生抗药性等，开发新型细菌抑制剂依然十分迫切。

发明内容

本发明的目的是提供一种四环二萜类化合物及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种四环二萜类化合物，四环二萜类化合物如式(I)所示

四环二萜类化合物的制备方法：将长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)cf-11接种于真菌液体培养基中发酵培养，发酵产物纯化后，即为式(I)所示的二萜类化合物，所述长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)cf-11，其于2012年04月25日保存于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC M 2012141

具体制备步骤：

1)将长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)cf-11接种于真菌液体培养基中静止发酵30天，过滤，发酵液经乙酸乙酯萃取浓缩，收集的菌丝体用有机溶剂提取，而后再经乙酸乙酯萃取浓缩，发酵液所得浓缩物和菌丝体所得浓缩物合并，即为粗提物；

所述长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)cf-11，其于2012年04月25日保存于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC M2012141；

2)取步骤1)中的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3)收集步骤2)中以洗脱液体积比50∶1-30∶1梯度的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行凝胶柱层析、高效液相和薄层层析分离纯化，纯化收集Rf值为0.6-0.7组分，即得如式(I)所示的四环二萜类化合物。

步骤1)中的有机溶剂提取液为庚烷、己烷、戊烷、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、丙醇、乙醇或甲醇中一种或几种(任意比例)。

步骤2)中的有机溶剂为石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮。

步骤3)所述凝胶柱层析洗脱液为体积比1-2∶1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；高效液相的洗脱剂为体积比3-4∶1甲醇-水；薄层层析展开剂为体积比为15-20∶1的石油醚-乙酸乙酯。步骤3)所述凝胶柱层析时收集粉红色斑点的组分。

四环二萜类化合物的应用，所述四环二萜类化合物用于制备杀虫剂或抑菌制剂。所述四环二萜类化合物用于制备大肠杆菌或葡萄球菌的杀菌制剂。

本发明具有以下优点：本发明通过分离于海洋绿藻刺松藻的长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)cf-11发酵经提取、分离获得的四环二萜类化合物，经杀虫活性实验得出化合物在100微克/毫升时对卤虫的致死率为82.6％，半数致死浓度为23.1微克/毫升；经抑菌活性实验得出化合物具有抑菌活性。

具体实施方式：

下面结合实施实例对本发明做进一步阐述。

实施例1

海藻内生真菌来源的四环二萜类化合物如式(I)所示。

实施例2

如式(I)所示的二萜类化合物的制备方法：