[发明专利]鸡胆汁来源的胞外体提取方法及其在免疫学上的应用

权利要求书

1.一种从鸡胆汁中提取的胞外体，其特征在于：该胞外体具有典型杯状结构的双层脂质膜，含有肝源性和上皮细胞源性的蛋白成分，所述的肝源性的蛋白成分为C-反应蛋白或天冬氨酸氨基转移酶或玻连蛋白或其混合物；所述的上皮细胞源性的蛋白成分为粘蛋白。

2.根据权利要求1或所述的胞外体，其特征在于：该胞外体还携带免疫球蛋白或多聚免疫球蛋白受体或其混合物。

3.根据权利要求1或2所述的胞外体，其特征在于：所述胞外体直径在30-150nm，质量密度范围为1.13-1.19g/cm³。

4.根据权利要求2所述的胞外体，其特征在于：该胞外体表面上呈递有MHC Ⅰ分子或可与MHC Ⅰ分子结合的抗原肽，或带有淋巴细胞共刺激分子，或上述物质共存。

5.制备如权利要求1所述的胞外体的方法，其特征在于：具体步骤如下：

将从SPF鸡或其他经过常规免疫的商品禽类胆囊，离体4h内抽取的胆汁，胆汁在4℃低温条件下经逐级离心去细胞碎片取上清，经滤膜过滤，依次4℃110,000g离心2h沉淀用PBS重悬，然后4℃110,000g离心90min后用PBS溶解沉淀，所得溶液中即包含鸡胆汁胞外体；

其中所述的逐级离心为1000～2000g 15～20min，3000～4000g 20～30min，7000～8000g 45～50min，10000～15000g 40～60min。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述经过4℃110,000g离心90min后的沉淀通过30wt%、45wt%、60wt%的蔗糖溶液进行密度梯度离心。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述的逐级离心为2000g15min，4000g30min，8000g45min，15000g 60min。

8.如权利要求1所述的胞外体，在用于激活体内外免疫反应或作为免疫反应佐剂，参与免疫调节，作为抗应激类药物的应用。

9.如权利要求1所述的胞外体，作为载体在制备治疗肝脏或胆囊或肠道疾病药物上的应用。