[发明专利]一种从茶多糖中获取均一果胶多糖的方法及获得的均一果胶多糖

权利要求书

1.一种从茶多糖中获取均一果胶多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)将干燥茶叶或提取茶多酚后的干燥茶渣粉碎至40～100目；

b)用水于100℃提取二次，第一次加水体积是茶叶或茶渣质量的15倍，第二次加水体积是茶叶或茶渣质量的10倍；合并二次提取液，浓缩，加入乙醇进行醇沉，控制醇沉体系中的乙醇浓度为40vol%或70vol%；醇沉24小时后，过滤，收集沉淀；对沉淀进行离心和冷冻干燥，得茶叶多糖粗品或茶渣多糖粗品；

c)将步骤b)获得的茶叶多糖粗品或茶渣多糖粗品上样于DEAE-Sepharose柱，依次用水、0.1mol/L的氯化钠水溶液、0.2mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱；使用硫酸-苯酚法跟踪洗脱曲线，分别收集利用0.1mol/L的氯化钠水溶液和0.2mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱的有效部位；

d)将步骤c)得到的有效部位分别用适量水或0.2mol/L的氯化钠水溶液进行溶解，离心，取上清液上样于丙烯葡聚糖凝胶色谱柱或葡聚糖凝胶色谱柱，用水或0.2mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱；利用示差折光检测器检测跟踪洗脱曲线，根据洗脱曲线收集洗脱的有效部位；浓缩，冷冻干燥，即得均一果胶多糖：均为1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖。

2.由权利要求1所述方法获得的均一果胶多糖，包括如下果胶多糖中的任意一种或二种以上：

平均分子量为2.7×10⁵道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为90.7%，甲酯化度为28.0%，乙酰酯化度为1.97‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPS4-1B；

平均分子量为3.1×10⁴道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为100%，甲酯化度为28.4%，乙酰酯化度为4.84‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPS4-2A；

平均分子量为1.0×10⁴道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为99.5%，甲酯化度为35.0%，乙酰酯化度为0的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPS7-1B；

平均分子量为6.5×10⁴道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为87.6%，甲酯化度为9.5%，乙酰酯化度为57.2‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPS7-2A；

平均分子量为8.6×10⁵道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为99.0%，甲酯化度为30.5%，乙酰酯化度为1.27‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPSR4-1B；

平均分子量为3.7×10⁵道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为98.5%，甲酯化度为28.3%，乙酰酯化度为9.15‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPSR4-2A；

平均分子量为6.5×10⁴道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为100%，甲酯化度为33.3%，乙酰酯化度为0的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPSR7-1B；

平均分子量为2.8×10⁵道尔顿，半乳糖糖醛酸含量为100%，甲酯化度为26.1%，乙酰酯化度为7.97‰的1,4连接的聚半乳糖醛酸类果胶多糖，记为TPSR7-2A。

3.一种权利要求2所述的TPS4-1B均一果胶多糖的制备，其特征在于，包括如下步骤：

11)将干燥茶叶粉碎至40～100目；

12)用水于100℃提取二次，第一次加水体积是茶叶质量的15倍，第二次加水体积是茶叶质量的10倍；合并二次提取液，浓缩，加入乙醇进行醇沉，控制醇沉体系中的乙醇浓度为40vol%；醇沉24小时后，过滤，收集沉淀；对沉淀进行离心和冷冻干燥，得茶叶多糖粗品；

13)将步骤12)获得的茶叶多糖粗品上样于DEAE-Sepharose柱，依次用水、0.1mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱；使用硫酸-苯酚法跟踪洗脱曲线，收集利用0.1mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱的有效部位；

14)将步骤13)得到的有效部位用适量0.2mol/L的氯化钠水溶液进行溶解，离心，取上清液上样于丙烯葡聚糖凝胶色谱柱，用0.2mol/L的氯化钠水溶液进行洗脱；利用示差折光检测器检测跟踪洗脱曲线，根据洗脱曲线收集洗脱的有效部位；浓缩，冷冻干燥，即得所述的均一果胶多糖。