[发明专利]用于检测阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒

权利要求书

1.一种能识别阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂的单克隆抗体，其特征在于：它是由杂交瘤细胞株4F2所分泌的。

2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株4F2，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:C201248。

3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，它是以阿散酸与亚硝酸钠重氮化后的偶氮化合物与牛血清白蛋白偶联后作为免疫原制备得到的。

4.权利要求1或3所述的单克隆抗体在制备检测阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留的酶联免疫试剂盒中的应用。

5.包含权利要求1或3所述的单克隆抗体的试剂盒。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，该试剂盒是检测阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留的酶联免疫试剂盒。

7.权利要求5所述的试剂盒在阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留检测中的应用。

8.一种检测阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留的酶联免疫方法，其步骤如下：

（1）将阿散酸与亚硝酸钠重氮化后的偶氮化合物与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；

（2）将阿散酸在戊二醛作用下与卵清蛋白偶联得到包被原；

（3）用步骤（1）的免疫原制备得到保藏号为CCTCC NO:C201248的杂交瘤细胞株4F2；

（4）用保藏号为CCTCC NO:C201248的杂交瘤细胞株4F2制备单克隆抗体；

（5）用步骤（2）的包被原包被固相载体；

（6）样品前处理：饲料样品粉碎后用饲料提取液温育，然后用稀释液稀释后检测；肌肉样品均质后用组织提取液提取，然后氮气吹干，最后用稀释液稀释，得待测物；

（7）对步骤（6）的待测物进行检测，

其中，

饲料提取液的组分及配比为：量取200mL甲醇，缓慢倒入800mL的样品稀释液中，混匀；

组织提取液的组分及配比为：称取50mL20%三氯乙酸，加入至950mL乙腈中，混匀；

样品稀释液的组分及配比为：NaCl 8.0g，KH₂PO₄ 0.2g，Na₂HPO₄·12H₂O 2.9g，KCl 0.2g，加双蒸水定容至1000mL。

9.权利要求8所述的酶联免疫方法在阿散酸、硝苯胂酸和卡巴胂残留检测中的应用。