[发明专利]一种筛选功能菌群的方法无效
申请号: | 201210177482.9 | 申请日: | 2012-05-31 |
公开(公告)号: | CN102703321A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 崔宗均;王小芬 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00;C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 功能 方法 | ||
1.一种筛选功能菌群的方法,由如下步骤组成:
1)选取含有功能菌群的基质;
2)将所述基质接种于限制性培养基中进行培养,再传代培养;
3)建立评价所述功能菌群功能的指标;在每代培养过程中检测所述指标和检测所述功能菌群中菌种组成是否稳定;
4)若在某代培养过程中,所述指标符合对所述功能菌群的功能要求,且所述菌种组成稳定,则所述某代培养过程中得到所述功能菌群;
所述限制性培养基为所述功能菌群在其中生长、且不属于所述功能菌群的菌不能在其中生长的培养基。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述培养的条件与所述功能菌群在所述基质中生存的条件相同。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述功能菌群为分解木质纤维素的菌群。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述基质为秸秆柴垛腐烂的垛底、常年堆积的秸秆或常年堆积的树叶。
5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于:所述限制性培养基由终浓度为5g/L的蛋白胨、终浓度为1g/L的酵母提取物、终浓度为5g/L的NaCl、终浓度为1g/L的K2HPO4、终浓度为0.35g/L的MgSO4·7H2O、终浓度为3g/L的CaCO3和终浓度为0.1g/L的秸秆组成;所述终浓度为各物质在所述限制性培养基中的浓度。
6.根据权利要求3-5中任一所述的方法,其特征在于:所述评价所述功能菌群功能的指标为秸秆分解率;所述指标符合对所述功能菌群的功能要求为秸秆分解率在所述传代培养的各代间稳定。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述功能菌群为用于制备秸秆发酵饲料的菌群。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述基质为农作物秸秆、农作物赖以生长的土壤或农作物秸秆与农作物赖以生长的土壤的混合物;所述培养基为R-MRS培养基。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述评价所述功能菌群功能的指标为乳酸产率和pH值下降速度;所述指标符合对所述功能菌群的功能要求为:所述乳酸产率在所述传代培养的各代间稳定,和所述pH值下降速度为12小时内pH从6.4降至3.8。
10.根据权利要求3-9中任一所述的方法,其特征在于:所述检测所述功能菌群中菌种组成是否稳定的方法为在所述传代培养过程中,PCR扩增每代培养中的所述功能菌群的16S rDNA基因,得到各代的PCR扩增产物,比较各代的PCR扩增产物的图谱,若图谱稳定不变,则所述功能菌群中菌种组成稳定。
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