[发明专利]一种用于分离荔枝霜疫霉病菌的培养基

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于分离荔枝霜疫霉病菌的培养基。

背景技术

荔枝（Litchi chinensis Sonn.）是著名的岭南佳果，在北纬18°～31°均有种植，分布遍及海南、广西、云南、福建、贵州、四川、广东、台湾等8省区。2008年全国种植面积约900万亩，超过约820万亩的荔枝，成为种植面积最大的热带水果。我国的荔枝产量超过全球产量的60％。荔枝霜疫霉病是荔枝一种主要病害，该病害可以危害荔枝的花和果，花期发病，造成大量的枯花，幼果期发病，引起落果，成熟期发病，引起果实腐烂。在鲜果运输销售期，此病继续发展，也严重影响鲜果的贮运和外销，进而影响了荔枝产业的可持续稳定发展。药剂防治是目前防治该病最有效的方法之一。

荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora Litchi Chen ex Ko et al)以菌丝体和卵孢子在病叶、病果及土壤中越冬，为翌年的初侵染病源。翌年春末夏初产生孢子囊，随风雨传播，孢子囊产生的游动孢子侵入寄主叶片和果实为害。为了对荔枝霜疫霉病菌进行相关研究，以及调查病原菌的越冬菌量和田间发病情况，做好病害的预测预报，通过分离而获得纯化的荔枝霜疫霉病菌是必要的。

常规的病原菌分离方法是《植病研究方法》介绍的用75％乙醇和0．1%升汞液表面消毒处理。实际工作中，在实验室进行分离的样本往往不是新鲜样品，是经田间采样后存放有一定时间的病残体，这些荔枝病组织中就不可避免的常常带有其他杂菌，按常规方法进行分离组织病原菌时，由于这些杂菌的生长较荔枝霜疫霉病菌迅速，杂菌的菌丝常将荔枝霜疫霉病菌覆盖，而快速生长的细菌也会抑制荔枝霜疫霉病菌的生长。

传统病原菌分离方法中，利用普通培养基从病组织中分离荔枝霜疫霉时，采集的病组织若不消毒或是消毒时间短，造成培养时有杂菌污染，达不到分离纯化的目的。若消毒时间太长，往往在杀死杂菌的同时，也会把要分离的病原菌杀死，造成病原菌分离率往往不太高。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种杀菌剂、用于分离荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora Litchi Chen ex Ko et al)的培养基、和分离荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora Litchi Chen ex Ko et al)的方法。

本发明所提供的杀菌剂，其活性成分为如下1）或2）所示：

1）由苯醚甲环唑、多菌灵、利福平和青霉素组成；

2）由苯醚甲环唑、咪鲜胺、利福平和青霉素组成。

上述杀菌剂，所述1）所示杀菌剂中，所述苯醚甲环唑、多菌灵、利福平和青霉素的质量分数比为（10-20）：（10-50）：（50-100）：（50-100），具体为10：10：50：50，或15：20：70：70，或20：50：100：100；

上述杀菌剂，所述2）所示杀菌剂中，所述苯醚甲环唑、咪鲜胺、利福平和青霉素的质量分数比为（10-20）：（10-50）：（50-100）：（50-100），具体为10：10：50：50，或15：20：70：70，或20：50：100：100。

本发明所提供的用于分离荔枝霜疫霉病菌(Peronophythora Litchi Chen ex Ko et al)的培养基，为如下Ⅰ或Ⅱ所示：

Ⅰ、是向白云豆培养基中添加权利要求1或2中所述1）所示杀菌剂得到的；

Ⅱ、是向白云豆培养基中添加权利要求1或2中所述2）所示杀菌剂得到的。

上述Ⅰ所示培养基中，所述苯醚甲环唑在所述白云豆培养基中的浓度为10μg/mL-20μg/mL，具体为10μg/mL、15μg/mL或20μg/mL；所述多菌灵在所述白云豆培养基中的浓度为10μg/mL-50μg/mL，具体为10μg/mL、20μg/mL或50μg/mL；所述利福平在所述白云豆培养基中的浓度为50μg/mL-100μg/mL，具体为50μg/mL、70μg/mL或100μg/mL；所述青霉素在所述白云豆培养基中的浓度为50μg/mL-100μg/mL，具体为50μg/mL、70μg/mL或100μg/mL；