[发明专利]一种香青兰提取物及其指纹图谱检测方法

权利要求书

1.制备香青兰提取物的方法，其包括以下步骤：将香青兰药材粉碎；加入药材重量5-30倍的水提取30-90分钟；再加入水体积1-3倍的95%乙醇继续加热回流提取30-90分钟；提取液回收乙醇并浓缩、干燥，即得。

2.一种香青兰提取物，其是基本上按照权利要求1所述的方法提取得到的。

3.用指纹图谱方法检测和评价香青兰药材或香青兰提取物的方法，该方法包括如下步骤：

(a)取供测试的香青兰药材或供测试的香青兰提取物，所述供测试的香青兰药材照本发明第一方面所述方法处理得到香青兰提取物(由此获得的香青兰提取物或者前述供测试的香青兰提取物，二者可称为供试品，或者可称为供试品提取物)；

(b)另取对照的香青兰药材或对照的香青兰提取物，所述对照的香青兰药材照本发明第一方面所述方法处理得到香青兰提取物(由此获得的香青兰提取物或者前述对照的香青兰提取物，二者可称为对照品，或者可称为对照品提取物)；

(c)分别精密称取供试品提取物和对照品提取物适量，用50-100倍体积的甲醇溶解，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液分别称为供试品溶液和对照品溶液，用于高效液相色谱(HPLC)分析；

(d)高效液相色谱条件为：色谱柱为C₁₈色谱柱，流动相为0.1%的磷酸水溶液-乙腈；流速0.8~1.2ml/min；采用200-400nm波长紫外检测记录每一波长下成分响应值的方式检测；梯度洗脱方式为：

(e)吸取步骤(c)的供试品溶液和对照品溶液，分别将其注入高效液相色谱中，照(d)项所述色谱条件进行洗脱，分别得到供试品HPLC图和对照品HPLC图；

(f)比较步骤(e)所得供试品HPLC图和对照品HPLC图。

4.用指纹图谱方法检测和评价香青兰药材或香青兰提取物的方法，该方法包括如下步骤：

(i)取供测试的香青兰药材或供测试的香青兰提取物，所述供测试的香青兰药材照本发明第一方面所述方法处理得到香青兰提取物(由此获得的香青兰提取物或者前述供测试的香青兰提取物，二者可称为供试品，或者可称为供试品提取物)；

(ii)另取对照的香青兰药材或对照的香青兰提取物，所述对照的香青兰药材照本发明第一方面所述方法处理得到香青兰提取物(由此获得的香青兰提取物或者前述对照的香青兰提取物，二者可称为对照品，或者可称为对照品提取物)；

(iii)分别精密称取供试品提取物和对照品提取物适量，用50-100倍体积的甲醇溶解，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液分别称为供试品溶液和对照品溶液，用于高效液相色谱(HPLC)分析；

(iv)高效液相色谱条件为：色谱柱为C₁₈色谱柱，流动相为0.1%的磷酸水溶液-乙腈；流速0.8~1.2ml/min；采用200-400nm波长紫外检测记录每一波长下成分响应值的方式检测；梯度洗脱方式为：

(v)吸取步骤(iii)的供试品溶液和对照品溶液，分别将其注入高效液相色谱中，照(iv)项所述色谱条件进行洗脱，分别得到供试品HPLC图和对照品HPLC图；

(vi)比较步骤(v)所得供试品HPLC图和对照品HPLC图；

(vii)使哺乳动物分别口服步骤(i)的供试品提取物或者步骤(ii)的对照品提取物，口服后0.5-10小时内取生物样品，提取该生物样品，得到生物供试品溶液(由步骤(i)的供试品提取物口服后获得)或生物对照品溶液(由步骤(ii)的对照品提取物口服后获得)；

(viii)吸取步骤(vii)的生物供试品溶液和生物对照品溶液，分别将其注入高效液相色谱中，照(iv)项所述色谱条件进行洗脱，分别得到生物供试品HPLC图和生物对照品HPLC图；

(ix)比较步骤(viii)所得生物供试品HPLC图和生物对照品HPLC图。