[发明专利]一种结晶法提高甜菊糖总甙含量的方法

说明书

技术领域：

本发明属于生物工程和新型甜味剂领域，特别涉及一种提高甜菊糖总甙含量的方法。 

背景技术：

甜菊糖是从菊科草本植物甜叶菊中精提的新型天然甜味剂。它具有高甜度、低热能的特点，其甜度是蔗糖的200—350倍，热值仅为蔗糖的1／300。是继甘蔗、甜菜之外第三种最具有开价值和健康推崇的天然蔗糖替代品，被誉为“世界第三糖源”。甜菊糖在一般着色性，安全无毒，被广泛应用于食品、酿酒、医药、日用化工等行业。 

甜菊糖的九种甜味成分中，甜菊甙、莱鲍迪甙A(RA)和莱鲍迪甙C(RC)的相对含量较高，共占90%以上，是决定甜菊糖味质的主要成分。RA甜度最高，相当于蔗糖的450倍，甜味特性也与蔗糖相接近；甜菊甙甜味相当于蔗糖的300倍，具有一定的苦味和不愉快的后味，影响了甜菊糖的味质，限制了其更为广泛的应用。 

现有技术中并无一种简单易行的方法既能提高甜菊糖总甙含量又能提高莱鲍迪甙A含量的工艺。 

发明内容：

本发明解决的技术问题是提供一种能提高甜菊糖总甙含量的工艺。 

本发明提供一种利用下述工艺提高甜菊糖总甙含量的方法，工艺流程为： 

将甜菊糖原料溶于有机溶剂中，保持温度为30-50℃，保持3-10小时进行结晶； 

结晶过程中进行搅拌，搅拌转速为20-150rpm； 

上述结晶溶液进行固液分离，固体物质用溶剂洗涤除去母液杂质，烘干获得精制甜菊糖； 

结晶溶液的固液分离选择抽滤或离心分离； 

所述甜菊糖原料的质量与溶剂的质量体积比为1:1.5-8； 

所述甜菊糖原料的质量与溶剂的质量体积比优选为1:1.5-6； 

上述甜菊糖原料总甙含量不得低于85%； 

所述有机溶剂为甲醇与丙醇的混合溶剂； 

所述甲醇或丙醇纯度为95-100%； 

所述甲醇或丙醇纯度优选为98-100%； 

所述甲醇与丙醇的比例为1:2-10； 

所述甲醇与丙醇的比例优选1:3-8； 

所述结晶温度优选35-45℃，结晶时间优选3-8小时； 

所述结晶过程的搅拌转速优选20-100rpm； 

所述固液分离的离心机转速为2000-5000rpm； 

上述结晶分离后的固体洗晶时固体湿重与溶剂的体积比为1:1.5-8，洗晶时间为15-50min； 

上述精制样品的烘干温度为45-85℃。 

有益效果： 

本发明可将甜菊糖原料的总甙由85%-90%提高至95%以上； 

本发明可提高甜菊糖精制样品中RA的比例，进而改善甜菊糖的整体品质； 

本发明生产时搅拌与控温的能耗较低，操作简单，易于规模化、连续化生产； 

本发明中精制后样品的收率为30%-80%，母液可浓缩后回收，溶剂可蒸馏后循环利用，实现了较好的经济效益和较低的环境污染。 

具体实施方式：

下面通过具体的实施方案叙述本发明方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的结晶条件进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。 

甜菊糖总甙的测定法法如下： 

HPLC定量测定方法（JECFA 2010会议标准） 

检测步骤：按照以下液相色谱条件检测每种糖甙的含量。 

试剂：乙腈，在210nm下检测透光度>95%. 

标准品规格： 

甜菊甙标准品：干重纯度>99% 

莱鲍迪甙A标准品：干重纯度>99% 

含有9种甜菊糖甙的基准溶液：鲍含甜菊甙、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙D、莱鲍迪甙F、杜尔克甙A、悬钩子甙和甜菊双糖甙。用7:3的水乙腈溶液将含有9 种甜菊糖甙的标准溶液进行稀释，以便用来确定各个糖甙的出峰时间。标准品可在日本Wako公司和美国ChromaDex公司买到。 

标准品溶液的配制：精确称取50毫克甜菊甙标准品和50毫克莱鲍迪甙A标准品，分别放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水乙腈溶液进行溶解至50毫升刻度。 

样品溶液的配制：精确称取50－100毫克甜菊甙样品，放入50毫升的容量瓶中，然后加入7:3的水乙腈溶液进行溶解至50毫升刻度。 

检测步骤：