[发明专利]一种固定脂肪酶的方法及其用途有效
申请号: | 201210184083.5 | 申请日: | 2012-06-06 |
公开(公告)号: | CN103468668B | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 穆彦魁;郑妍;辛本荣;杨天奎;徐学兵;李超;张贵银 | 申请(专利权)人: | 益海(佳木斯)生物质能发电有限公司 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C01B33/12;C01B32/318 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司31100 | 代理人: | 陈哲锋 |
地址: | 154004 *** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 固定 脂肪酶 方法 及其 用途 | ||
技术领域
本发明涉一种固定脂肪酶的方法及其用途,具体的,涉及一种利用白炭黑固定脂肪酶的方法及其用途。
背景技术
脂肪酶作为一种催化油脂水解,酯交换,酯化反应的一类酶,因其催化条件温和,选择性高等特点,在食品加工,医药,造纸,精细化工等行业有着广泛的应用。然而游离的酶因为稳定性差,且难以与产物分离,难以实现规模化的工业生产。固定化酶技术是将游离的酶通过各种手段将其束缚或限制于一定区域内,使其仍然能进行特有的催化反应并能回收重复使用的一种技术,由于上述优点,国内外许多科研工作者展开了对固定化酶的广泛研究。随着研究的深入,许多技术和产品已经被开发并且得到了广泛的应用。
WO8906278A1描述了一种固定化TL酶的方法,通过培养腐殖霉属的真菌或经过基因改造的腐殖霉属真菌获得含有脂肪酶的发酵液,以酚醛型或者丙烯酸型树脂为固定化载体,固定化过程为将一定量的一定pH值酶液加入处理好的弱碱性大孔型离子交换树脂中,在室温下震荡8h,然后水洗,室温真空干燥,得产品。
EP1239045A1描述了一种固定化TL酶的方法,具体为将脂肪酶粉末溶解在磷酸缓冲液中,加入乙醇和聚丙烯型树脂ACCUREL MP1001,室温下震荡过夜。通过过滤收集固定化酶,用缓冲液清洗,室温下进行干燥。
然而,到目前为止,市场上现有的TL固定化酶并不能满足生产要求。其催化的酯交换反应中发现产物中存在大量的皂,大量浪费原料,增加成本。因此目前固定化的TL需要大量的油脂洗脱,造成大量的原料浪费。同时为下游的分离提纯带来了巨大的困难,限制了其在油脂工业上的应用。
因此,本领域中迫切需要开发出新的固定化脂肪酶,使得脂肪酶保持较高活力且在反应中不产生大量的皂,从而扩大脂肪酶在食品工业的应用范围。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种固定脂肪酶的方法,使脂肪酶具有良好的反应活性,并且在酯交换的使用过程中减少皂的产生,降低了由于皂产生的后处理带来的成本上升。
该方法是对目前工艺进行改进,选择了一种新型的载体对脂肪酶进行固定化,产生了良好的酯交换活力,并且使用过程中产生了降低皂含量的效果,使油脂在酯交换的后处理过程中减少或简化了操作步骤。
本发明中的固定脂肪酶的方法包括:
(a)脂肪酶的固定化:将脂肪酶与白炭黑载体接触,使脂肪酶固定在白炭黑载体上;
(b)干燥:将固定有脂肪酶的白炭黑载体进行干燥。
在本发明的一个具体实施方式中,所述的白炭黑选自比表面积200-1000m2/g,优选250-500m2/g。
在本发明的一个具体实施方式中,对固定有脂肪酶的载体进行干燥的方法包括:冷冻干燥、真空干燥、沸腾流化床干燥和室温干燥等常规干燥方法。
在本发明的一个具体实施方式中,在步骤(a)的脂肪酶的固定化过程过加入酶蛋白交联剂,酶蛋白交联剂选自戊二醛、聚乙烯亚胺、聚丙烯亚胺、聚乙烯胺、明胶和/或精胺中的一种或几种。
在本发明的一个具体实施方式中,在步骤(a)脂肪酶的固定化中不添加缓冲液,发明人意外发现,不添加缓冲液后会使得到的固定化脂肪酶具有更好的效果,一方面在酯交换活力方面有所提高,另一方面意外的减少了酯交换过程中皂的产生,给下游的分离提纯带来了好处。
在本发明的一个具体实施方式中,固定脂肪酶的载体优选为白炭黑与活性炭的混合物,利用该混合物作为载体提升了固定化酶的活力并且减少了酯交换中皂的产生,并且效果优于任何一种单独的载体的效果。
在本发明的一个具体实施例中,所述的脂肪酶和/或载体未经过任何前处理而用于步骤(a)的固定化中。而发明人发现未经过处理而直接进行本发明的脂肪酶固定化方法取得了良好的效果,本领域的技术人员应当可以理解,对本发明的白炭黑载体进行相应的前处理,应当会取得更好的技术效果。
在本发明的一个具体实施例中,所述经处理的载体与脂肪酶以g/ml计的重量/体积比为25:1~1:25,优选10:1~1:10,更优选1:1.5~1:0.5,最优选1:1。
本发明的第二目的在于提供一种固定化脂肪酶,其可以采用如上述任意一种固定化脂肪酶的方法制备。
本发明的第三目的在于提供如前所述的固定脂肪酶的白炭黑载体在酯交换中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于益海(佳木斯)生物质能发电有限公司,未经益海(佳木斯)生物质能发电有限公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210184083.5/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。