[发明专利]一种翦股颖克灵的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从翦股颖原料中提取制备翦股颖克灵的方法。

背景技术

翦股颖克灵（Agroskerin）是一种二萜类化合物，分子式为C₂₀H₃₀O₃，分子量为318.46，为树脂状物，[α]D-54°(c=0.1,氯仿)。化学号：114076-69-6。主要存在于大戟科(Euphorbiaceae)霍氏翦股颖Agrostistachys hookeri Benth.& Hook.f.枝。

现代药理研究表明，翦股颖克灵具有细胞毒活性。对P388淋巴白血病细胞的ED50为1.4μg/mL。目前对翦股颖克灵的研究较少，因此提供一种简便且易于工业化生产翦股颖克灵的方法具有重要的意义，为翦股颖克灵的开发研究奠定了基础。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种翦股颖克灵的制备方法，该方法快速、简便、产品含量高。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

A.超临界萃取：取翦股颖原料，经粉碎处理，加入超临界萃取釜中，用丙酮作为夹带剂，进行萃取，得到萃取液；

B.溶剂萃取：将萃取液浓缩，回收丙酮，用二氯甲烷萃取多次，合并二氯甲烷萃取液，浓缩得二氯甲烷浸膏；

C.氧化镁柱层析：将二氯甲烷浸膏与氧化镁混合烘干，上氧化镁短程柱层析，正己烷-二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩至小体积，干燥得翦股颖克灵。

步骤A所述超临界CO₂萃取条件为：萃取釜压力为20-45MPa，萃取釜温度为35-55℃，萃取时间为2-5h，采用上述参数进行萃取，再经解析得到萃取液。

步骤C所述氧化镁短程柱柱径高比为1:3-5，所述梯度洗脱顺序为按正己烷-二氯甲烷-甲醇体积比3:1:0、2:1:0、1:3:1、1:5:2进行梯度洗脱。

本发明的积极效果在于：

1、采用超临界CO₂萃取，环保无污染，效率高，能耗较低；

2、柱层析前采用溶剂萃取，降低了非目标物质的浓度和含量，从而减少了后续柱层析的分离纯化的负担，降低了生产成本；

3、氧化镁短程柱处理量大，可获得纯度较高的翦股颖克灵。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取翦股颖原料1kg粉碎处理，加入超临界CO₂萃取釜中，萃取釜压力为45MPa，萃取釜温度为35℃，CO₂流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入800ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为2h，在解析釜中收集解析物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏2倍量的二氯甲烷萃取4次，收集合并二氯甲烷萃取液，减压浓缩得二氯甲烷浸膏；将二氯甲烷浸膏与氧化镁按质量比1:2混合烘干，再取新氧化镁装柱（径高比1:3），将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-二氯甲烷-甲醇混合溶剂依次按体积比3:1:0、2:1:0、1:3:1、1:5:2进行洗脱，收集翦股颖克灵洗脱液，回收试剂，浓缩干燥得产品10.2mg，含量91.4%。

实施例2：

取翦股颖原料1kg粉碎处理，加入超临界CO₂萃取釜中，萃取釜压力为20MPa，萃取釜温度为55℃，CO₂流量为4ml/g生药/min，保持釜压、温度不变，通入1000ml丙酮作为夹带剂，萃取时间为5h，在解析釜中收集解析物，减压回收丙酮，用相当于丙酮浸膏3倍量的二氯甲烷萃取3次，收集合并二氯甲烷萃取液，减压浓缩得二氯甲烷浸膏；将二氯甲烷浸膏与氧化镁按质量比1:2混合烘干，再取新氧化镁装柱（径高比1:5），将拌样氧化镁装于其上，用正己烷-二氯甲烷-甲醇混合溶剂依次按体积比3:1:0、2:1:0、1:3:1、1:5:2进行洗脱，收集翦股颖克灵洗脱液，回收试剂，浓缩干燥得产品9.3mg，含量93.1%。

实施例3：