[发明专利]一种采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法

权利要求书

1.一种采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）制备银耳菌的发酵培养物：挑取银耳菌种子接种于种子培养基中，在20~30℃、转速100~200r/min的条件下培养2~5d，获得种子液，将种子液以5~10%的接种量接种到发酵培养基中，在20~30℃、转速100~200r/min的条件下培养4~10d，获得银耳菌发酵培养物，所述种子液培养基和发酵培养基相同，其组成为：碳源20~30g.L^-1+氮源5~15g.L^-1+磷酸二氢钾 0.46g.L^-1+磷酸氢二钾1.0g.L^-1+硫酸镁1.0g.L^-1，pH6.0，所述碳源和氮源为适合银耳菌生长的碳源和氮源；

（2）将发酵培养物中的发酵液和菌丝体分离，取发酵液，在40℃~80℃减压浓缩后加入无水乙醇以除去多糖和蛋白质，高速离心除去沉淀；

（3）将（2）步骤制得的发酵液浓缩后采用大孔树脂吸附，然后依次用蒸馏水和乙醇洗脱，收集洗脱液，将其浓缩后低温结晶得粗晶体；

（4）将粗晶体放入乙醇溶液中进行重结晶，所获得的棕红色晶体即为卵孢菌素晶体。

2.根据权利要求1所述的采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于：（1）步骤中培养基所采用的碳源为葡萄糖、蔗糖、^，乳糖或麦芽糖，氮源为有机氮源或/和氨基酸。

3.根据权利要求2所述的采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于：所述有机氮源为豆粕、玉米浆、蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉中的一种或几种的组合，所述氨基酸为缬氨酸、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸中的一种或几种的组合。

4.根据权利要求1所述的采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于：（2）步骤中所加入的乙醇体积为浓缩后发酵液体积的2~5倍。

5.根据权利要求1所述的采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于：（3）步骤中洗脱时所用乙醇的浓度为55~95%。

6.根据权利要求1所述的采用银耳菌制备卵孢菌素晶体的方法，其特征在于：（4）步骤中所用乙醇的浓度与（3）步骤所用乙醇的浓度相同。