[发明专利]一株功能植物乳杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株功能植物乳杆菌，以及利用该功能植物乳杆菌生产的微生物饲料添加剂、制备方法及应用。

背景技术

微生物饲料添加剂是根据微生态平衡与失调理论、微生态营养理论和微生态防治理论选用动物体内正常微生物成员及其促进物质经微生物发酵和不同的加工工艺而制成的活菌制剂。它能够在数量或种类上补充肠道内减少或缺乏的正常微生物，调整或维持肠道内微生态平衡，增强机体免疫功能，促进营养物质的消化吸收，从而达到防病治病、提高饲料转化率和畜禽生产性能之目的。微生物饲料添加剂以其无毒副作用、无耐药性、无残留、成本低、效果显著等特点，逐渐得到人们的肯定并发展迅速，是抗生素的有效替代品。

植物乳杆菌是人和动物肠道的正常菌群，广泛存在于传统发酵食品中，已有众多研究证明植物乳杆菌在抑制病原菌生长繁殖，促进机体对营养物质消化吸收，提高机体免疫力等方面具有重要的生物学功能。植物乳杆菌通过与病原菌对限制性营养素的能力竞争，来抑制病原菌的生长，调节肠道微生态的组成，形成生物学屏障。同时，通过其代谢所产生的代谢产物乳酸、细菌素、以及双乙酰对其它细菌的作用，调整菌群之间的关系，维持和保证菌群最佳优势组合以及这种组合的稳定，阻止了致病菌的定殖和入侵，拮抗致病菌和有害微生物的生长及其毒素的粘附，是一种理想的微生物饲料添加剂。同时植物乳杆菌的中β葡萄糖苷酶具有较高的活性，能降解饲料中的植物性原料常含有毒性和抗营养化合物。

筛选功能植物乳杆菌对开发多功能性的微生物饲料添加剂具有现实意义，同时多功能性微生物饲料添加剂也是发展生态农业，提高畜牧业经济效益，保障畜产品品质和畜产食品安全的重要发展方向。

发明内容

本发明的目的是公开一株功能植物乳杆菌及其应用，该菌株可在高温和低pH条件生存，产生对多种病原菌和腐败菌具有广谱抑制作用的细菌素。

本发明的一方面在于：公开一株功能植物乳杆菌，该菌株是分离自市售东北传统酸菜发酵渍物的新菌株，经鉴定后确认为功能植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）DLH-502，其在2011年10月12日，保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。其保藏编号为CGMCC No.5338。

本发明所述的保藏编号为CGMCC No.5338的功能植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）DLH-502经形态鉴定及生物学特性研究，其具有如下特征：

菌落形态：乳白色，湿润，表面光滑，中间凸起，边缘整齐。

细胞形态：革兰氏染色阳性，短杆菌。无鞭毛，不形成芽胞，兼性厌氧菌。

生理生化特征：菌株的生理生化实验和碳源发酵实验如表1。

本发明所述菌株的16s rRNA基因进行PCR扩增与碱基序列测定，其测序结果如序列表中的SEQ ID NO：1。

本发明的另一个目的是：上述的功能植物乳杆菌DLH-502在生产微生物饲料添加剂中的应用。

上述的功能植物乳杆菌DLH-502在生产微生物饲料添加剂中的应用，具体是指，在生产活菌制剂和广谱抑菌作用的细菌素方面的应用。

在上述的应用中所述的抑菌作用中，抑菌是指抑制细菌，所包括的细菌具体为下述中的一种：肠炎沙门氏菌（Salmonella enterica）、大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、小肠结肠炎耶尔森氏菌（Yersinia enterocolitica）、肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella peneumoniae）、单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。

本发明下述具体实施例中，使用用肠炎沙门氏菌（ATCC 13076）为抑菌指示菌，与功能植物乳杆菌DLH-502混合后作为实验组，证明本发明所述的功能植物乳杆菌DLH-502在生产广谱抑菌作用的细菌素方面具有广阔的应用前景。

本发明的另一个目的是：提供一种利用上述的功能植物乳杆菌DLH-502制备发酵活性成分，其制备方法的步骤包括：

①菌种活化：将功能植物乳杆菌DLH-502的菌种接种培养基，在25～38℃培养12～20小时，菌数至少达1.0×10⁸CFU/mL，获得活化菌种；