[发明专利]一种纯化替莫瑞林的方法

说明书

技术领域

本发明属于反相HPLC技术领域，尤其是涉及一种批量化产业化纯化替莫瑞林（Tesamorelin）的方法。

背景技术

替莫瑞林是一种生长激素释放因子（GRF）类似物，是采用人工合成法生产的，它包含人体 GRF 中的 44 个氨基酸序列trans-3-hexenoyl-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-Arg-Ala-Arg-Leu-NH₂ 。目前对替莫瑞林的研究发现，替莫瑞林具有可以阻止脂肪代谢障碍的人类免疫缺陷病毒(H IV)感染患者中腹部脂肪过多的作用，这一发现，使得替莫瑞林在 HIV患者药物治疗时所产生腹部脂肪过多的这一副作用具有里程碑的意义。

对于HIV患者在进行抗病毒治疗时，药物有时也会干扰人体的某些正常功能。药物研发的最终目标总是希望能够发明更安全、更有效、人体更易耐受的药物。大家都知道，“是药三分毒”，大多数艾滋病患者、临床医生都认为：目前的抗艾滋病药物并不完美，关键在于我们怎样对他的副作用进行监测 从而取得最大的治疗效果。很多HIV感染者抗逆转录病毒治疗期间出现内脏脂肪组织蓄积的现象，这个过程与心血管危险性增加相关，长期下去，HIV患者同样会因药物治疗的副作用而危害到生命。研究者对使用生长激素释放因子类似物替莫瑞林减少内脏型肥胖的作用进行了研究，以期望得到解决现有药物所产生的副作用。

替莫瑞林醋酸盐（tesamorelin，商品名为 Egrifta），由加拿大 Theratechnologies 公司研制，2010 年11月10日经美国 FDA 批准在美国由 EMD Serono 公司独家上市，用于HIV 相关性脂肪代谢障碍的治疗，是 FDA 批准的首个用于治疗脂肪代谢障碍的药物，而Egrifta 有效成分就是替莫瑞林（tesamorelin）醋酸盐。目前国内对醋酸盐替莫瑞林的记载很少，几乎没有，更缺少能生产大量替莫瑞林的方法。针对替莫瑞林对HIV治疗时所产生副作用的有效疗效来看，替莫瑞林将是将来市场上不可或缺的原料药物产品，而现在人工合成的替莫瑞林原料药，也已提上日程。

针对目前市场上对于醋酸盐替莫瑞林的需求，本发明利用反相高效液相色谱法对固相合成的替莫瑞林进行分离纯化，不仅可以批量化的生产，而且可以得到高纯度的替莫瑞林，不仅解决了目前市场上醋酸盐替莫瑞林的紧缺，同时也为研究机构对于替莫瑞林减少内脏型肥胖作用的药物研究提供更充足的原料需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一条适于产业化纯替莫瑞林的方法，主要解决现有技术不能分离得到产业化的高纯度替莫瑞林的技术问题。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种纯化替莫瑞林的方法，包括如下步骤：

1）将固相合成所得替莫瑞林粗肽用去离子水溶解，固定相为反相硅胶柱，流动相为两相，其中磷酸三乙胺缓冲溶液为A相，色谱纯乙腈为B相，进行梯度洗脱纯化，收集目的峰值的肽溶液；

2）将所得到的肽溶液进行减压旋蒸浓缩，留浓缩液备用；

3) 将减压旋蒸浓缩后的肽溶液采用阴离子交换树脂交换转成醋酸盐；

4）将最终的高纯度醋酸肽溶液再次减压旋蒸浓缩冷冻干燥，得粉末状成品。

优选的方案是：所述A相的磷酸三乙胺缓冲液的pH为2.0~3.5。

更为优选的方案是：所述A相的磷酸三乙胺缓冲液的pH为2.5~3.0。

优选的方案是：所述色谱纯乙腈即流动相B的质量百分浓度为12-65%，检测波长为220nm。

更为优选的方案是：所述色谱纯乙腈即流动相B的质量百分浓度为15-55%。

所述的反相硅胶柱为四烷基硅烷键合硅胶、八烷基硅烷键合硅胶或十八烷基键合硅胶中的一种。

所述的阴离子交换树脂是德国朗盛阴树脂（Lewatit ）MP60或日本三菱化学阴树脂（Diaion ）WA-30。

本发明的有益效果是：本发明的提出的一条适于产业化纯替莫瑞林的工艺方法，使用反相高效液相色谱法纯化替莫瑞林，并用阴离子交换树脂交换转盐，不仅能得到HPLC纯度大于98.0%的精肽，而且可以批量化生产，达到纯度高，收率高，成本低，效率快的要求。

具体实施方式

实施例1