[发明专利]一种快速打破南方红豆杉种子休眠的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种快速打破南方红豆杉种子休眠的方法。

背景技术

紫杉醇（Paclitaxel，商品名Taxol）是20世纪六七十年代从红豆杉科（Taxaceae）红豆杉属（Taxus L.）植物树皮中分离出来的一种天然的四环二萜类生物碱，其在治疗宫颈癌、乳腺癌、小细胞肺癌、黑素瘤和结肠癌等方面有显著的疗效。紫杉醇首先在太平洋短叶红豆杉的树皮和形成层中提取出来。按照目前的纯化技术，生产1kg的紫杉醇大约需要10吨红豆杉树皮。这大约需要从2000到4000棵60-70年生的红豆杉中才能获得。据相关资料介绍，每年全球大约需要消耗250kg紫杉醇纯品。这需要从250万千克树皮或者75万棵红豆杉中提取才能满足这一市场的需要。随着对紫杉醇需求量的日益递增，目前仅仅从天然的红豆杉林树体中提取分离紫杉醇的产量已经不能满足医药市场需要，加之大肆的开采使红豆杉自然资源日趋枯竭、红豆杉资源自然更新能力差、生长缓慢、濒危灭绝，各国政府已明文规定禁止砍伐野生红豆杉资源。因此紫杉醇其他途径的开发就显得极为重要，其中利用人工栽培的红豆杉中提取分离紫杉醇是目前获取紫杉醇及半合成前体的一条重要途径，这可以加强对红豆杉野生种质资源及其生态环境的保护。

红豆杉种子具有较长的休眠期，采收后必须在低温下用湿沙层积贮藏，春季播种后，其发芽期可延至第二年，红豆杉种子的这种发芽特性严重影响了其种苗的生产。植物组织培养技术是一种不依赖于环境条件进行生产的技术，通过红豆杉种胚离体培养，即可以获得更多的红豆杉种苗，可以克服生产中种子萌发率不高的特性，也可以将种胚直接或者间接的诱导成细胞系生产紫杉醇。

红豆杉种子中含有较多抑制种子萌发的物质。南方红豆杉种子中含有正庚酸、壬酸、乙酸等发芽抑制物质，其种皮、内种皮和胚乳的浸泡液对白菜种子发芽率和幼苗的生长、根生长均有抑制作用，并且与浸提液浓度呈正比（张艳杰等，南方红豆杉种子种发芽抑制物的研究，南京林业大学学报（自然科学版），2007,4（31）:51-58）。成熟的种子较未成熟的种子萌发率高（Yang F，et al，In vitro embryo culture of Taxus chinensis var.mairei，Journal of Anhui Normal University(Natural Science),2010,3(33):262-269）。