[发明专利]多种免疫增强剂的无细胞制剂、其制备方法及用途

权利要求书

1.一种假单胞菌制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的假单胞菌制剂的无细胞制剂是由假单胞菌制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

2.一种卡介菌多糖、核酸制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的卡介菌多糖、核酸制剂的无细胞制剂是由卡介菌多糖、核酸制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

3.一种红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂的无细胞制剂是由红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

4.一种A群链球菌制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的A群链球菌制剂的无细胞制剂是由A群链球菌制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

5.一种绿脓杆菌制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的绿脓杆菌制剂的无细胞制剂是由绿脓杆菌制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

6.一种布氏菌制剂的无细胞制剂，其特征在于，所述的布氏菌制剂的无细胞制剂是由布氏菌制剂经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

7.一种治疗用母牛分枝杆菌的无细胞制剂，其特征在于，所述的治疗用母牛分枝杆菌的无细胞制剂是由治疗用母牛分枝杆菌的菌体经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

8.一种耻垢分支杆菌的无细胞制剂，其特征在于，所述的耻垢分支杆菌的无细胞制剂是由治疗用耻垢分支杆菌的菌体经灭活破碎后提取有效组份制备的无细胞制剂，粒度为10～1000nm，优选10～800nm，更优选10～500nm。

9.根据权利要求1所述的假单胞菌制剂的无细胞制剂、权利要求2所述的卡介菌多糖、核酸制剂的无细胞制剂、权利要求3所述的红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂、权利要求4所述的A群链球菌制剂的无细胞制剂、权利要求5所述的绿脓杆菌制剂的无细胞制剂、权利要求6所述的布氏菌制剂的无细胞制剂、权利要求7所述的母牛分枝杆菌的无细胞制剂、权利要求8所述的耻垢分支杆菌的无细胞制剂，所述无细胞制剂为革兰氏阳性菌的热原均小于320EU/ml，优选小于120EU/ml。

10.权利要求1所述的假单胞菌制剂的无细胞制剂、权利要求2所述的卡介菌多糖、核酸制剂的无细胞制剂、权利要求3所述的红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂、权利要求4所述的A群链球菌制剂的无细胞制剂、权利要求5所述的绿脓杆菌制剂的无细胞制剂、权利要求6所述的布氏菌制剂的无细胞制剂、权利要求7所述的母牛分枝杆菌的无细胞制剂、权利要求8所述的耻垢分支杆菌的无细胞制剂，所述无细胞制剂的制备方法包括以下步骤：

(1)将所述制剂加热煮沸15～60分钟得到灭活菌液；

(2)无菌试验合格的菌液经洗涤后，在无菌条件下用破碎装置破碎菌体；

(3)菌体破碎后的悬液经离心后收集沉淀，洗涤沉淀制成悬液；

(4)将悬液分装后加热灭菌，得到所述制剂的无细胞制剂。

11.根据权利要求10所述的无细胞制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述的破碎装置为超高压射流对撞机，其压力为500～2000kgf/cm²，破碎至少1次，将菌体破碎到粒度小于1000nm、优选粒度10～500nm。

12.根据权利要求10所述的无细胞制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述的洗涤是将沉淀物用无菌生理盐水离心洗涤至少2次。

13.根据权利要求10所述的无细胞制剂的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，菌体破碎后悬液的离心条件是在4℃～室温下，6000～20000rpm离心10～150分钟；所述的洗涤是将沉淀物用无菌生理盐水离心洗涤1～5次。