[发明专利]一种刺参速生性状相关SRAP标记的筛选方法无效
| 申请号： | 201210204434.4 | 申请日： | 2012-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN102732624A | 公开（公告）日： | 2012-10-17 |
| 发明（设计）人： | 孙国华;杨建敏;刘相全;王卫军;任利华 | 申请（专利权）人： | 山东省海洋水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人： | 郭官厚 |
| 地址： | 264006 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 刺参 速生 性状 相关 srap 标记 筛选 方法 | ||
1.一种刺参速生性状相关SRAP标记的筛选方法，其特征在于，操作步骤为：以具有快速生长性状的速生F(fast)组刺参30头和普通野生S(slow)组刺参30头为材料，提取刺参基因组DNA，采用分离群体混合分析BSA法和SRAP技术相结合，共340对引物组合分别对两个池DNA 进行PCR扩增，聚丙烯酰胺凝胶电泳，筛选得到在F组个体中出现频率明显高于在S组个体中出现频率的差异条带。
2.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述差异条带的引物组合为F06-R10、F08-R03、F11-R11，差异条带为06-10-A、08-03-B、11-11-C。
3.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述分离群体混合分析法即BSA法具体为从F组刺参基因组和S组刺参基因组中各取样本10个，每个取5μLDNA溶液混合构成相应的F混合基因池和S混合基因池。
4.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为25μL，包含100ng的模板，0.2mM dNTP，正反引物分别0.4μM，1U Taq酶，2.5μL 10×buffer；反应条件为：94℃ 预变性5min；94℃ 变性1min，35℃ 复性1min，72℃ 延伸1min，进行5个循环；94℃ 变性1min，50℃ 复性1min，72℃ 延伸1min，30个循环； 72℃ 延伸5min，4℃ 保温。
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