[发明专利]含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法与应用，尤其涉及一种含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法与其作为Cu²⁺荧光探针的应用。

背景技术

罗丹明B具有摩尔消光系数大，量子产率高，背景干扰小等优点，修饰后可作为金属离子荧光探针进行研究，并用作标记生物分子。近年来，利用罗丹明B荧光探针用于检测活体细胞中金属离子的报道越来越多。

铜在人体中为含量仅次于铁和锌的微量元素，铜参与铜蓝蛋白、超氧化物歧化酶（SOD）、赖氨酸氧化酶、谷光氨肽还原酶、细胞色素C氧化酶等十几种酶的构成，并促进铁的吸收和运输，间接参与造血功能，所以铜在人体新陈代谢中起非常重要作用。缺铜时容易引起缺铜性贫血、动脉粥样硬化、毛发脱色症、免疫力低下、婴儿发育迟缓、遗传性缺铜—Menkes综合征以及Wilson症等病症。人体中铜过量会引起溶血性贫血、肝肾功能损伤；铜在脑组织沉积，引起帕金氏综合症等脑组织病变。而且一般肿瘤细胞中具有较高含量的铜离子，促进肿瘤细胞血管生成，导致肿瘤增值。所以细胞内铜离子检测与定位对于阐明其生理病理作用极其重要。

发明内容

本发明目的是提供一种含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法，同时利用其作为Cu²⁺荧光探针具有非常高的选择性和灵敏度，并用于活细胞中检测铜离子的存在。

本发明所述的含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物，结构式如式（I）所示：

式（I）。

上述含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物的合成方法，由罗丹明B酰肼（1）与对甲氧基苯甲酰基异硫氰酸酯（2）在乙腈中回流反应得到罗丹明B硫代双酰肼衍生物（3），产率97%；将制得的罗丹明B硫代双酰肼衍生物的氯仿溶液与5±0.1当量的85wt%水合肼在回流条件下，反应1±0.1小时，经柱层析纯化得到式（I）所示含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物（4），产率26.6%。

上述合成路线反应式如下：

本发明所述含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物作为活细胞内Cu²⁺荧光探针的应用。

其中：所述活细胞优选HeLa细胞。

上述含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物对Cu²⁺具有非常高的选择性和灵敏度，其作为活细胞内Cu²⁺荧光探针可用于活细胞中检测铜离子的存在。